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目的:探索支链脂肪酸(branched chain fatty acids,BCFA)iso-15:0和iso-18:0的降脂作用及其机制,为支链脂肪酸的生物活性研究和开发提供理论依据,以期为非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的天然药物或保健食品研发提供新思路。方法:以人正常肝细胞系(L02)为实验材料,用FFA(free fatty acid,油酸:棕榈酸=2:1)体外模拟建立人单纯性肝甘油三酯沉积模型,采用不同浓度的iso-15:0或iso-18:0对L02细胞进行处理,通过噻唑蓝(MTT)法检测L02细胞增殖率,GPO-PAP法测定细胞内甘油三酯(TG)含量,油红O染色法测定细胞内脂质水平以监测两种BCFA的作用效果;并进一步采用荧光定量PCR法和Western Blotting法分别从m RNA和蛋白水平检测脂类代谢关键因子(包括PPAR-α、CPT1、CPT2、ACOX1、SREBP-1c、ACC、m TOR、FASN m RNA和PPAR-α、CPT1、SREBP-1c、ACC、AMPK、P-AMPK蛋白)在上述处理细胞模型中的变化,以探讨两种BCFA的作用机制。实验所得数据均采用SPSS19.0进行分析,以P<0.05为显著差异。结果:(1)用1 m M FFA处理L02细胞24 h时能极显著提高细胞内TG的含量(P<0.01),且对细胞增殖无明显影响,符合单纯脂肪变性模型的特征。(2)两种支链脂肪酸iso-15:0和iso-18:0均能降低单纯脂肪变性模型L02细胞内脂质的含量。(3)iso-15:0和iso-18:0对脂质的下调主要通过下调肝脏脂肪合成相关酶SREBP-1c、ACC、FASN的m RNA表达水平,以及SREBP-1c和ACC的蛋白表达水平,并上调脂肪分解关键酶PPAR-α、CPT1、CPT2、ACOX1的m RNA表达水平,以及PPAR-α、CPT1和AMPK的蛋白表达水平而实现。结论:支链脂肪酸iso-15:0和iso-18:0在体外有显著的降脂作用,其作用机制可能是通过降低肝脏细胞部分脂肪合成关键酶包括SREBP-1c、ACC、FASN的表达,同时提高部分脂肪分解关键酶包括PPAR-α、CPT1、CPT2、ACOX1的表达水平,并激活AMPK能量代谢通路,使细胞内脂肪合成速度减慢,从而加快脂肪分解代谢而实现。