造血祖细胞激酶1(HPK1)是造血系统特异性丝氨酸、苏氨酸蛋白激酶，属于哺乳动物Ste20相关蛋白激酶的MAP4K家族。为了阐明HPK1在缺血性脑损伤中的作用及其分子机制，本研究主要采用免疫沉淀、免疫印迹、免疫组化以及组织学等方法，通过脑室注射HPK1反义寡核苷酸来研究HPK1在全脑缺血所引起的迟发性神经元损伤中的作用及其可能的机制。通过脑室注射Src激酶特异性抑制剂PP2，腹腔注射NMDA受体特异性拮抗剂MK801来探讨脑缺血损伤时HPK1的上游事件。结果显示：全脑缺血/复灌6小时后HPK1酪氨酸磷酸化水平与对照组相比显著增高。HPK1反义寡核苷酸可以显著第一部分：　　 抑制脑缺血/复灌所引起的p-HPK1，p-MLK3，p-MKK7和p-JNK3的增高。同时HPK1反义寡核苷酸对脑缺血/复灌所引起迟发性神经元死亡有保护作用。PP2和MK801预处理的实验组能显著降低脑缺血/复灌所引起的p-Src，p-HPK1，p-MLK3，和p-JNK3的增高。PP2和MK801预处理的实验组对脑缺血/复灌所引起迟发性神经元死亡有保护作用。结果提示：1.HPK1在神经系统表达并并参与激活MLK3-JNK3信号通路。2.脑缺血/复灌时HPK1的激活是通过NMDAR-Src通路介导的。3.抑制HPK1的表达及其激活对全脑缺血所引起的迟发性神经元死亡具有保护作用。　　 第二部分：　　 NMDA受体和AMPA受体在脑缺血中都起着重要的作用。本室前期研究结果表明KA受体GluR6亚基通过GluR6·PSD95·MLK3信号模块激活JNK而参与脑缺血损伤。本文利用分子生物学技术设计并构建了含有KA受体GluR6亚基羧基末端基因的腺病毒pAd-GluR6-C，采用免疫沉淀、免疫印迹、免疫组化以及组织学等方法来研究它对缺血性脑血管疾病的作用及其机制。结果显示：在细胞水平，KA诱导的神经元凋亡可以被pAd-GluR6-C所抑制。在整体水平，重组腺病毒pAd-GluR6-C对脑缺血/再灌注诱导的海马CA1区神经元的迟发性死亡具有保护作用。其机制是腺病毒pad-GluR6-C竞争性结合PSD95，从而抑制了GluR6·PSD95·MLK3信号模块的组装，继而抑制MLK3和JNK3的激活，并通过核通路抑制FasL的表达从而起到了拮抗海马CA1区迟发性神经元死亡的作用。为缺血性脑血管疾病的治疗提供了新的手段。