基于胆碱能神经及氧化应激损伤探讨金思维神经保护作用机制

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:vbwu
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目的:本实验通过建立东莨菪碱记忆障碍模型,采用中药复方金思维进行干预,观察金思维对东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠学习记忆的改善作用和对胆碱能系统及氧化应激损伤的影响,探讨该药的神经保护作用机制。方法:将108只ICR小鼠随机分为正常对照组(0.5%CMC)、模型组(0.5%CMC)、阳性对照组(多奈哌齐组)(0.92mg/kg,溶于0.5%CMC)、金思维大、中、小剂量组(20mg/kg、10mg/kg、55mg/kg,溶于0.5%CMC),每组18只,按0.1ml/10g小鼠体重连续灌胃给药30天。在第23天开始小鼠灌胃1小时后造模,对照组腹腔注射生理盐水,其余各组腹腔注射东莨菪碱(3mg·kg-1·d-1,溶于0.9%生理盐水),按O.1ml/10g小鼠体重连续注射8天。第23和24天注射10min后,开始进行跳台培训和检测、第25~30天注射30min后进行Morris水迷宫试验。试验结束后立即取材,通过生化检测对ACh、AChE、ChAT、MDA、T-SOD和GPX的活性或含量进行观察,通过Western-blot对AChE、ChAT、SOD1和GPX1的蛋白表达进行观察,通过免疫组织化学染色方法对ChAT、SOD1和GPX1的分布进行观察。结果:1.Morris水迷宫实验结果显示,金思维可以减少东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠的游泳距离和游泳时间,增加在目标象限的停留时间,表明金思维对东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠的学习记忆有改善作用。2.生化检测结果显示,模型组小鼠皮层和海马ACh含量减少(P<0.05)、MDA含量明显增加(P<0.01),AChE活性明显升高(P<0.01),ChAT、GPX1和SOD1的活性降低(P<0.01或P<0.05)。各干预组和模型组比,ACh含量增加(P<0.01或P<0.05)、皮层MDA含量明显减少(P<0.01),海马MDA含量没有统计学意义(P>0.05),皮层和海马中AChE活性降低(P<0.01或P<0.05),ChAT、GPX1和SOD1的活性升高(P<0.01或P<0.05)。3.Western-blot和免疫组织化学染色方法检测结果显示模型组AChE的蛋白表达明显升高(P<0.01),ChAT、GPX1和SOD1的蛋白表达和分布减少(P<0.01或P<0.05)。各干预组和模型组比,AChE的蛋白表达明显降低(P<0.01),ChAT、GPX1和SOD1的蛋白表达和分布增多(P<0.01或P<0.05)。结论:金思维可以改善东莨菪碱导致的记忆障碍模型小鼠学习记忆能力,其机制可能与保护胆碱能神经元和减少氧化应激损伤有关。
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