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肥胖及相关代谢疾病正极大地危害着人类健康,而脂肪过量积累是引起肥胖的关键的诱因。组织蛋白酶L(Cathepsin L,CPL)通过降解胞外基质而参与饮食诱导的脂肪沉积的过程,但是其是否介导细胞自噬参与脂质代谢的分子机制还不清楚。CPL作为溶酶体半胱氨酸蛋白酶主要是在溶酶体中发挥作用,溶酶体是细胞内酸性细胞器,溶酶体与自噬小体融合形成自噬溶酶体,从而参与细胞自噬过程。最近研究表明,细胞自噬在生物体脂质重构中发挥着重要的作用,但是CPL通过调控细胞自噬参与脂肪积累过程的作用还有待确认。为了在模式动物秀丽隐杆线虫(C.elegans)中研究这一作用,本论文首先扩增了线虫Cpl-1(Cathepsin L-like proteases,CPL-1,Cathepsin L在线虫中同源基因)基因,构建重组原核表达质粒pET28a::CPL-1,并将其转化到大肠杆菌BL21中诱导表达,纯化了CPL-1融合蛋白,制备了相应的多克隆抗体,经ELISA和western blot检测该抗体具有良好的效价和专一性。在此基础上,本研究进一步探讨了CPL-1介导细胞自噬参与了饮食诱导的线虫脂肪沉积过程的作用。利用LGG-1::GFP线虫模式,我们发现在葡萄糖诱导脂质沉积过程中,细胞自噬相关基因表达都显著升高。其中,4mM葡萄糖诱导脂肪沉积诱导自噬水平最高。而且,CPL-1与细胞自噬水平有着很强的相关性。相应地,在高糖饮食诱导下的线虫cpl-1突变体中,自噬相关基因表达显著降低。最终,通过RNA干扰降低线虫自噬相关基因bec-1及lgg-1的表达,也能降低高糖饮食诱导的线虫脂肪沉积。这些结果表明,CPL-1所介导的细胞自噬参与了线虫中的饮食诱导的脂肪沉积过程。综上所述,本研究制备了线虫CPL-1的多克隆抗体,并发现了CPL-1介导细胞自噬参与线虫饮食诱导脂肪沉积过程中的作用,提出了组织蛋白酶调控脂肪沉积的新机制。