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目前广泛使用的丝裂霉素C（MMC）法制备饲养层（Feeder）细胞（简称“传统方法”）有诸多问题有待优化：（1）产量低，成本高，消耗大量的人力物力；（2）易出现细胞增殖抑制不充分；（3）小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）的生物学行为易受影响，得到的Feeder细胞质量不高；（4）操作不灵活，易错过最佳处理时机等。因此，有必要开发新的方法，既能单批获得大量高质量的Feeder细胞，又能保证细胞增殖被充分抑制。首先，本研究在传统方法基础上进行改进优化，建立了悬浮-贴壁法，它能提高抑制细胞有丝分裂的效率，同时，还能筛选出状态良好的细胞作为Feeder，提高所得Feeder的质量。而且，我们无需密切观察MEFs的生长密度，不用担心错过最佳处理时间，操作更为灵活方便。其次，本研究对悬浮-贴壁法进一步优化，建立了利用细胞培养转瓶机CELLSPINSystem快速制备Feeder细胞的方法。CELLSPIN System的搅拌锤可在电磁场作用下不断旋转，能使细胞在悬浮状态下与培养基中的MMC充分接触，可明显提高MMC抑制细胞增殖的效率，缩短处理时间；悬浮状态下处理细胞，回收时无需消化液消化，可减少酶消化带来的细胞损伤，最大限度地保持细胞的良好状态；旋转瓶的容积是普通培养瓶/皿的数倍甚至上百倍，短时间内可处理大量细胞，在提高Feeder制备效率的同时，又能明显降低Feeder细胞的制备成本。所以，细胞培养转瓶机法便于人胚胎干细胞（hESCs）和人诱导型多潜能干细胞（hiPSCS）的大规模生产。