银杏叶黄酮类化合物的提取、分离纯化及其生物活性研究

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银杏叶提取物中含有多种活性物质,如黄酮类、萜内酯类化合物等,具有改善心脑血管循环、抗病毒、抗癌、防衰老及降低胆固醇等医药保健功效,而且银杏叶提取物毒副作用小,食用安全。本文以银杏叶为原料,研究了银杏叶中黄酮类物质的提取工艺、分离纯化方法及抗氧化作用,并通过颜色反应、紫外吸收光谱法等初步鉴定了银杏叶黄酮类化合物。   1.采用超声法辅助提取法对提取工艺进行了研究,实验结果显示:超声功率500W,温度35±5℃条件下,液料比15.5:1、乙醇浓度63%、超声时间35min、精致萃取时间5min,为银杏叶黄酮超声萃取法的最佳工艺条件,在此条件下黄酮提取率为7.1lmg/g,与预测值7.31mg/g的相对误差为2.35%。   2.通过响应面优化得到微波-超声波辅助法提取银杏叶中黄酮类化合物的最佳工艺条件为:超声功率500W,温度354±5℃条件下,液料比15:1、乙醇浓度63%、超声时间16min、微波时间66s,在此条件下黄酮提取率为8.28mg/g,与预测值8.52mg/g的相对误差为2.82%。   3.得到黄酮类化合物粗提液后,对粗提液中的黄酮类化合物的纯化方法进行了探索。试验结果表明:AB-8型大孔吸附树脂对银杏叶黄酮的吸附分离效果较好,其最佳纯化条件采用吸附流速为2BV/h,吸附液浓度为0.84mg/mL,吸附液pH在4.2左右,采用梯度洗脱,洗脱剂为70%乙醇溶液,洗脱流速为IBV/h,洗脱剂用量为3BV。经过AB-8型大孔吸附树脂精制后银杏叶黄酮的纯度为67.80%。纯化后的样品通过颜色反应法及紫外吸收光谱法初步鉴定,确定为黄酮及黄酮醇类化合物。   5.银杏叶提取物对自由基的清除、抗氧化性、及抑菌效果的研究结果表明,银杏叶黄酮具有良好清除.OH、·DPPH自由基能力和抗氧化能力及总还原能力。对大肠杆菌、草生欧文氏杆菌及金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用,但对真菌类抑菌效果不明显。银杏叶提取物的抑菌效果不如同等浓度的芦丁标准品及绿茶提取物。
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