鸡c-Myc基因新转录本对成肌细胞增殖、分化和凋亡的影响

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骨骼肌的生长发育直接影响着肉鸡的产肉量。c-Myc是调控胚胎发育和细胞生长的重要因子,在骨骼肌的生长发育中发挥着重要作用,但具体的机制尚不清楚。本研究在成肌细胞和胚胎期肌肉组织中克隆发现鸡c-Myc的三个新转录本,将其命名为c-Myc-2、c-Myc-3、c-Myc-4,其中c-Myc-2缺失了鸡c-Myc的整个第二外显子。组织表达分析发现c-Myc-2在胚胎期中后期的腿肌中高表达,使用蛋白表达标签检测结果发现c-Myc-2是长链非编码RNA。在成肌细胞中过表达c-Myc-2后,通过EdU试验、流式细胞术和qRT-PCR检测其对成肌细胞生长发育的影响,结果发现c-Myc-2抑制成肌细胞增殖和分化,并有促进其凋亡的作用。我们进一步利用数字基因表达谱分析c-Myc-2过表达鸡成肌细胞的基因互作网络,对过表达c-Myc-2细胞和空白对照组差异基因分析共筛选出294个差异基因(倍数变化≧2,校正后的P值≦0.05),其中204个上调,90个下调。这些差异基因显著富集到细胞周期、p53信号通路和生长因子活性等与鸡生长发育相关的一些通路。验证细胞周期通路中的部分差异基因,结果与测序结果一致。另外本研究筛选c-Myc的SNP并在杏花×隐性白洛克鸡全同胞F2资源家系群体中进行关联分析,结果发现多态性位点g.1215C>A和g.1834T>C位点与体重、胫长、胫围等相关生长性状显著相关。总的来说,本研究首次发现c-Myc的三个新转录本,并揭示了新转录本c-Myc-2在鸡成肌细胞中的作用及所涉及的分子调控通路,进一步补充了c-Myc在鸡骨骼肌发育中的作用,为鸡生长性状的分子育种提供理论基础。
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