安吉小鲵(Hynobius amjiensis)是我国特产的珍稀濒危两栖动物,2013年3月本研究团队在安徽省清凉峰国家级自然保护区发现了安吉小鲵在安徽省的新分布点,为安吉小鲵的物种保护和研究提供了新的基地。本研究从2014年至2017年连续对安徽省清凉峰国家级自然保护区安吉小鲵种群进行了野外监测。研究中,共设置了83个1m×1m的样方(60个利用样方,23个对照样方)并选择了与安吉小鲵野外生存有关的15个生态因子作为变量,用Mann-Whitney U方法检验利用样方和对比样方生境数据的差异性,采用主成分分析方法研究了安吉小鲵野外栖息地的生境特征。结合上述栖息地质量分析结果及研究中监测到的安徽省清凉峰国家级保护区安吉小鲵的种群数量动态变化,我们对安吉小鲵种群在保护区的资源现状进行总结,并提出了相应的保护管理建议。研究中,同时还开展了安吉小鲵物种的人工繁育初步研究。通对人工繁育下的21条幼体安吉小鲵成长的体重(m)、总长(l1)、尾长(l2)、前肢长(l3)和后肢长(l4)进行了连续记录测定,并采用非线性模型对安吉小鲵幼体生长曲线进行了分析与拟合研究。与此同时,针对野外采样过程中安吉小鲵幼体(卵袋、蝌蚪)鉴别困难的问题,本研究还开发出一种基于位点特异性PCR技术的安吉小鲵物种鉴定方法。主要研究成果如下:(1)生境因子分布频次、Mann-Whitney U方法与主成分分析法综合分析表明影响安吉小鲵繁殖期生境的主要因子为气温(≤6℃)和水温(5℃~7℃),次要因子是土壤类型、植被类型。这表明安吉小鲵原生的高山草甸类型栖息地对其繁殖期的正常生存十分关键。此外,对清凉峰安吉小鲵种群的数量调查表明,2014年至2017年安吉小鲵卵袋数目分别为101条、91条、85条、82条。(2)利用Gompertz、Logistic和von Bertalanffy 3种非线性生长曲线模型对安吉小鲵幼体的生长发育规律进行数学模拟,结果表明安吉小鲵幼体的体重(m)、总长(l1)、尾长(l2)、前肢长(l3)和后肢长(l4)的生长过程用Logistic曲线模型方程拟合的效果最好,拟合度(R2)分别为:0.9966、0.9973、0.9994、0.9854、0.9911。(3)根据安吉小鲵与近缘两栖动物的Cyt b基因序列比对结果,设计出1对安吉小鲵物种的位点特异性引物(HA-idF/HA-idR)。鉴定方法中,利用多重PCR扩增技术,搭配使用已被广泛利用的脊椎动物线粒体12S rRNA基因通用引物组合(H1478/L1091),根据扩增条带是否为2条即可快速、高效地实现对安吉小鲵物种的准确鉴定,为幼体(卵袋、蝌蚪)的鉴定提供了新方法。