曲安奈德对视网膜新生血管抑制作用的体内外实验研究

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目的 第一部分研究曲安奈德在增生性视网膜病变中不同时期给药的治疗效果及其与血管内皮生长因子的相互作用机制。 第二部分观察曲安奈德对正常和缺氧条件下体外培养恒河猴脉络膜视网膜内皮细胞(RF/6A)增殖的抑制作用。 第三部分研究曲安奈德对缺氧条件下恒河猴脉络膜视网膜内皮细胞VEGF表达的影响,探讨曲安奈德治疗视网膜脉络膜新生血管的作用机理。 方法 第一部分研究曲安奈德在增生性视网膜病变中不同时期给药的治疗效果及其与血管内皮生长因子的相互作用机制。分组:将鼠龄为7d、健康的C57BL/6J幼鼠80只160眼随机分成4组:预先治疗组[进氧箱前(出生7d)治疗组](n=20),晚治疗组[出氧箱后(出生12d)治疗组](n=20),正常对照组(n=20),给氧对照组(n=20)。建立氧诱导的血管增生性视网膜病变幼鼠模型。 动物模型制作:正常对照组幼鼠与哺乳母鼠一起在正常空气环境下饲养,预先治疗组、晚治疗纽及给氧组幼鼠与哺乳母鼠一起置于密闭容器内,氧气的流量控制在1.50~2.50L/min,用CY-100型数字测氧仪(浙江省建德市利达仪器厂)监测容器内的氧分压4次/d,使容器内氧体积分数为75%±2%,在此高氧环境中饲养5d后(生后第12d)将幼鼠取出,回到正常空气环境下饲养。预先治疗组于进氧箱前(出生7d),晚治疗组于出氧箱后(出生12d)幼鼠玻璃体腔内分别注射曲安奈德1μl(0.04mg),对侧眼注射相同体积的平衡盐溶液(balanced salt solution,BSS)作为对照。应用荧光素灌注荧光血管造影法,了解视网膜血管改变;取幼鼠眼球作普通病理切片及
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