桂木综合开发利用及质量评价初步研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chungkhoan2002
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目的:通过运用现代分析化学手段,以桂木叶及桂木果实为研究对象,对桂木叶化学成分及质量评价进行研究,初步建立桂木叶的质量评价体系;对桂木果实中各主要营养成分含量进行综合分析测定,评价桂木果汁的抗氧化活性,开发桂木果汁初产品,为桂木这一药用资源的综合开发利用及其质量评价提供科学依据。方法:1.桂木叶化学成分及质量评价初步研究采用柱层析法对桂木叶中化学成分进行分离纯化,结合紫外法、核磁共振波谱法及质谱法鉴定分离得到的化合物结构;采用薄层色谱法对桂木叶进行薄层鉴别;采用HPLC法测定桂木叶中儿茶素、墨沙酮6-O-葡萄糖苷及三叶豆苷含量;采用HPLC法建立17批桂木叶样品的指纹图谱,初步评价桂木叶质量。2.桂木果实综合利用—果汁产品开发前景研究分别采用直接干燥法、直接灰化法、榨汁法、相对密度计法、折射仪法、pH计法对桂木果实水分含量、总灰分含量、出汁率、果汁相对密度、可溶性固形物含量、有效酸度等常规理化指标进行分析测定;以考马斯亮蓝法测定果汁中总蛋白质含量、茚三酮法测定果汁中总氨基酸含量、2,4-二硝基苯肼法测定果汁中维生素C含量;以苯酚-硫酸法测定桂木果汁中总糖含量,HPLC-ELSD法测定果汁中果糖、葡萄糖、蔗糖含量;以pH电位法滴定法测定桂木果汁中总酸含量,离子色谱法测定桂木果汁中苹果酸、草酸、柠檬酸含量,综合分析测定桂木果实中各主要营养成分含量。分别采用DPPH法、水杨酸法、铁氰化钾还原法、总抗氧化能力试剂盒法对桂木果汁的DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、还原力及总抗氧化能力进行测定,综合评价桂木果汁的抗氧化能力。采用果胶酶酶解法对桂木果汁进行酶解澄清,并结合单因素试验结及正交试验结果以透光率为考察指标确定桂木果汁酶解澄清的最佳工艺;通过调节桂木原果汁、白砂糖及纯净水的比例用量,确定桂木澄清果汁口感调配的最佳方案;将调配好的果汁经进一步加工得到澄清的桂木果汁初产品。结果:1.桂木叶化学成分及质量评价初步研究由桂木叶中分离得到了三个化合物,分别鉴定为儿茶素、墨沙酮6-O-葡萄糖苷及三叶豆苷,其纯度均≥98%;以儿茶素、墨沙酮6-O-葡萄糖苷及三叶豆苷为对照品,供试品薄层色谱图中,17批桂木叶样品在各对照品相应的位置上均与其显相同斑点;HPLC法测得不同批次桂木叶中儿茶素含量为0.58mg·g-1~2.93mg·g-1、墨沙酮6-O-葡萄糖苷含量为3.43mg·g-1~8.55mg·g-1,三叶豆苷含量为1.20mg·g-1~4.87mg·g-1;建立了17批桂木叶的HPLC指纹图谱,经指纹图谱相似度评价软件处理后,共确定了 11个共有峰,其中5号峰与9号峰对应的化学成分得到确认,分别为墨沙酮6-O-葡萄糖苷及三叶豆苷;17批桂木叶样品的相似度为0.916~0.996。2.桂木果实综合利用—果汁产品开发前景研究桂木果实样品的水分含量为78.46%~82.12%、总灰分含量为7.16%~7.33%、出汁率为39.66%~43.05%、果汁相对密度为1.087~1.106g·cm-3、可溶性固形物含量为17.79%~19.73%、有效酸度为 2.91~3.48。桂木果汁样品的总蛋白质含量为0.329g·L-1~0.428g·L-1,总氨基酸含量为2.50mg·g-1~3.05mg·g-1,维生素C含量为0.37mg·g-1~0.45mg·g-1。桂木果汁样品的总糖含量为22.53%~30.17%,果糖含量为2.77%~4.92%,葡萄糖含量为2.32%~4.07%,蔗糖含量为4.59%~10.69%;桂木果汁样品的总酸含量为1.65%~3.68%,苹果酸含量为0.060%~0.123%,草酸含量为 0.0023%~0.0073%,柠檬酸含量为 1.58%~3.52%。桂木果汁DPPH自由基清除能力的IC50为3.23mg·mL-1,羟自由基清除能力IC50为12.13 mg·mL-1;随着浓度的增加,桂木果汁的还原力增强,两者呈明显的浓度-效应关系;桂木果汁总抗氧化能力水平为43.02U·mL-1。桂木果汁酶解澄清的最佳工艺为:果胶酶添加量0.03%,55℃水浴酶解2.5h;桂木澄清果汁口感调配的最佳配比为:原果汁35%(v/v),白砂糖6%(w/v),蒸馏水65%(v/v);将调配好的果汁经除杂及灭菌即得到色泽澄明、口感适宜、风味优良的桂木澄清果汁初产品。结论:1.首次由桂木叶中分离鉴定了儿茶素、墨沙酮6-O-葡萄糖苷、三叶豆苷3个黄酮类化合物,其纯度均≥98%;研究显示,采集的各批次桂木叶样品中均含有儿茶素、墨沙酮6-O-葡萄糖苷及三叶豆苷;叶片的老嫩程度及样品的采收时间对桂木叶中三种活性成分含量均存在一定影响,嫩叶中三成分的含量明显高于成熟叶。2.首次建立了桂木叶HPLC指纹图谱,各批次桂木叶样品HPLC指纹图谱相似度较高,所含化学成分具有高度一致性。3.初步制订了桂木叶质量标准,并限定以干燥品计桂木叶中儿茶素含量不得低于0.5mg·g-1,墨沙酮6-O-葡萄糖苷含量不得低于3mg·g-1,三叶豆苷含量不得低于1mg·g-1。4.桂木果实含水量高、营养丰富,与常见水果相比,其果汁富含维生素C、有机酸及糖类物质;桂木果汁中含有的主要糖类成分为蔗糖、果糖、葡萄糖,含有的主要酸类成分为柠檬酸,另含少量苹果酸及微量草酸;桂木果汁具有良好DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、还原力及总抗氧化能力,是天然的抗氧化剂,可作为良好的保健果汁及饮料源;实验优选及确立了桂木果汁酶解澄清的最佳工艺及果汁口感调配的最佳配比,并成功开发了桂木澄清果汁初产品,为桂木果实的综合利用奠定了良好基础。以上研究为桂木这一药用资源的综合开发利用及其质量评价提供了科学的参考依据。
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