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目的：筛选一种简单有效的小鼠ES细胞培养方法；获得一定代次的小鼠ES细胞；通过培养新生鼠脑神经细胞，探讨适合神经细胞生长的培养条件，为小鼠ES细胞神经向定向诱导分化及其在脑病模型上的应用奠定基础。结论：取14.5d的小鼠胎儿采用组织块培养法或混合培养法做成纤维细胞培养，5代前接种到四孔皿中，长满后用丝裂霉素C终止细胞分裂，不传代，洗涤处理后加入含LIF的培养液用作小鼠ES细胞分离培养体系，效果较好。于第4d采集小鼠囊胚或扩张囊胚，LIF辅助培养液中培养5～6d挑选类ES细胞集落消化传代，接种于饲养层细胞+含LIF培养液的培养体系或无饲养层培养体系中培养，每1～2d半量换液，6～8d传代一次，目前能稳定传至第四代。本方法简单可行，可用于小鼠ES细胞的分离培养。新生鼠脑组织剪碎消化后用DMEM+10％FBS+ITS培养，于37℃、5％CO2、饱和湿度，可获得生长良好的神经细胞。该培养条件适合神经细胞生长，可以用于小鼠ES细胞神经向诱导分化后的培养。