论文部分内容阅读
紫椴(Tilia amurensis Rupr.)是我国东北地区重要的经济树种,隶属于椴树科(Tiliaceae)椴树属(Tilia),为高大落叶乔木。紫椴花中多糖含量丰富,是一种理想的植物多糖原料,具有重要研究价值。本文以紫椴花为原料,对紫椴花多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性进行了系统研究,旨在为我国紫椴资源的综合开发利用提供新的方向和参考依据,具体研究内容及结果如下：紫椴花多糖提取工艺的优化研究。以紫椴花多糖得率为指标,采用微波提取、酶法辅助提取两种方法对紫椴花多糖提取工艺进行了优化。结果表明,微波提取紫椴花多糖得率高于酶法,可达12.57%,最佳工艺条件为：微波时间9.14min,微波功率585W,料液比1：67(g：mL)。紫椴花粗多糖的理化性质及体外抗氧化活性研究。通过苯酚-硫酸反应、斐林试剂反应等化学方法对紫椴花粗多糖的基本理化性质进行分析,得出紫椴花多糖具有多糖的通性,苯酚-硫酸法测得其总糖含量为65.28%,硫酸-咔唑法测得糖醛酸含量为39.25%。红外光谱分析显示紫椴花多糖有典型的多糖特征吸收峰。体外抗氧化实验表明紫椴花粗多糖具有还原能力,能够清除DPPH自由基和羟自由基,同时有很强的抑制脂质过氧化作用。当紫椴花多糖浓度为1.8mg·mL-1时,对羟自由基的清除率高达88.19%；当紫椴花多糖浓度为2.0mg·mL-1时,对脂质过氧化的抑制率已达到75.42%,高于相同浓度的抗坏血酸。紫椴花粗多糖体内抗氧化活性研究。通过建立D-半乳糖致小鼠衰老模型,研究紫椴花粗多糖体内抗氧化活性。结果表明紫椴花粗多糖能够显著提升衰老小鼠肝组织中T-SOD活性、血清中GSH-PX活性,同时显著降低衰老小鼠血清、肝组织和脑组织中MDA含量,其中低、中、高剂量组小鼠血清中MDA含量与模型组相比差异极显著,中、高剂量组小鼠脑组织中MDA含量与模型组相比差异极显著,显示出紫椴花粗多糖具有良好的体内抗氧化活性。紫椴花多糖的分离纯化及表征分析。采用DEAE-52阴离子纤维素交换层析对紫椴花多糖(TAP)进行纯化得到三个多糖组分(TAP-1、TAP-2和TAP-3)。对含量较多的TAP-3组分进行深入研究：采用紫外光谱扫描(UV)、冻融分析和高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对TAP-3进行纯度鉴定,确定TAP-3为不含核酸和蛋白质的均一多糖组分。采用红外光谱(FT-IR)、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)和气质联用(GC-MS)对TAP-3结构表征进行分析,得到TAP-3的相对分子质量为5376Da,是由核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖七种单糖以摩尔比例0.76：23.28：15.02：15.87：3.44：3.33：24.59组成的杂多糖。