筛选中药提取物及联合葡醛内酯醒酒活性和机理研究

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“酒文化”是中华民族饮食文化的一个重要组成部分,但是过量或长期饮酒,对人的肠胃、肝脏、肾脏等都会有不良的影响,容易导致一些疾病的发生;同时严重威胁着人们的家庭幸福和社会和谐。本课题根据市场对醒酒产品的需求,基于中药提取物温和缓解醒酒,副作用小的特点,联合葡萄糖醛酸内酯(葡醛内酯)开发一种快速醒酒,副作用小,价格低廉的醒酒产品,并研究其机理。(1)中药提取物筛选:本实验筛选了具有最佳醒酒活性的葛根40%乙醇提取物(PL-e40)和石斛水提取物(Dn-w)。从知网和万方数据库资料中筛选出具有较好醒酒活性的中药葛根、茯苓、石斛、甘草、枸杞等,分别利用纯水、40%和80%乙醇分别进行提取其各自活性物质,冷冻干燥后备用;利用传统的大鼠醒酒试验进行单因素检测,测定各物质醒酒活性。试验得出以蒸馏水灌胃醉酒大鼠和自然醒酒大鼠其醒酒时间均在400min以上,以葡萄糖醛酸内酯和“酒佳侣”灌胃醉酒大鼠,其最短醒酒时间分别为184±12min和167+9min;通过实验确定PL-e40和D-w分别206±19min和256±13min,相对自然醒酒能提前醒酒时间约48.5%和36.1%,为最佳实验材料。(2)醒酒配方调配:利用响应面方法,配比葡糖糖醛酸内酯(葡醛内酯)、PL-e40和D-w,并传统大鼠醒酒试验进行验证;大鼠灌胃北京红星二锅头(560)20m1/kg构建醉酒模型成功后,在13.67ml/mg葛根40%乙醇提取物,11.99mg/ml石斛水提取物和0.17mg/ml葡萄糖醛酸内酯(醒酒配方S-u)作用下,大鼠醒酒时间最短为149.3min,验证醒酒时间为149.67min,较阳性对照品“酒佳侣”醒酒时间167min缩短了约10.4%。(3)醒酒机理研究:大鼠灌胃二锅头和醒酒配方后,每一个小时取血一次(两次摘眼球取血,最后腹主动脉取血),处死后取出肝组织;分别对血液离心和肝组织匀浆,检测血清和肝组织匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)、乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)活性及丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量变化;另采用气相色谱仪检测血清和肝组织匀浆液中乙醇浓度变化。通过数据分析,本实验配方能通过提高血液和肝组织中SOD、ADH和ALDH活性,增加GSH含量,以降低MDA和乙醇含量,达到提前醒酒和防醉的作用。(4)S-u对肝组织保护作用:以S-u、生理盐水和“甘利欣”分别对大鼠连续进行14天灌胃后,进行二锅头(20m1/kg)灌胃,3h后,摘眼球取血,低温下静止4h,冷冻离心取上清,检测其血清中谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),过氧化氢酶(CAT),SOD等活性。实验发现S-u降低ALT,AST效果显著,并能明显提高肝脏内CAT和SOD活性,增加GSH含量,降低MDA浓度,对急性酒精性肝脏损伤具有较好的保护作用。
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