肝细胞癌中趋化因子CXCL5及其受体CXCR2的表达及意义

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目的检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及其配对癌旁组织中趋化因子生长调节基因5(C-X-C motif ligand5,CXCL5)及其受体CXC类趋化因子受体2(C-X-C motif receptor2,CXCR2)的蛋白表达情况、mRNA表达水平及肿瘤内的微血管密度(microvessel density,MVD),分析CXCL5及CXCR2的表达与MVD之间的关系,探讨CXCL5及CXCR2的表达与HCC临床病理特征之间的关系及其在HCC预后评估中的意义。方法采用免疫组织化学EnVision两步法检测石蜡包埋的HCC病例癌组织及配对癌旁组织中CXCL5及CXCR2的蛋白表达情况,并以CD34、D2-40抗体分别标记MVD及微淋巴管密度(microlymphatic density,MLD);运用实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescence quantitativepolymerase chain reaction, RT-qPCR)检测冰冻组织中CXCL5及CXCR2的mRNA表达水平,结合临床随访资料,对患者进行Kaplan-Meier生存分析。结果51例HCC及配对癌旁石蜡包埋组织和其中30例冰冻HCC及其配对癌旁组织中:(1)CXCL5蛋白在33例癌组织中高表达,高表达率为64.7%;在11例癌旁组织中高表达,高表达率为17.6%,蛋白表达水平癌组织高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。CXCL5蛋白的表达在不同肿瘤大小、病理分级、TNM分期及有无血管浸润组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),而在不同年龄、性别、饮酒史、HBsAg、HCV、AFP、GGT、肿瘤数目及是否合并肝硬化组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CXCL5在癌组织中的mRNA表达水平为8.05±10.50,高于癌旁组织(2.79±3.93),差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL5的mRNA表达水平在不同肿瘤大小、病理分级及有无血管浸润组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),但在不同年龄、性别、饮酒史、HBsAg、HCV、AFP、GGT、肿瘤数目、TNM分期及是否合并肝硬化组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)CXCR2蛋白在癌组织中呈高表达35例,高表达率68.6%;在癌旁组织中呈高表达8例,高表达率15.7%,蛋白表达水平癌组织高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001),CXCR2蛋白的表达在不同病理分级及有无血管浸润组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),但在不同年龄、性别、饮酒史、HBsAg、HCV、AFP、GGT、肿瘤数目、大小、TNM分期及是否合并肝硬化组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CXCR2在癌旁组织中的mRNA表达水平为1.88±1.42,高于癌组织(0.83±1.05),差异有统计学意义(P<0.05),但其mRNA表达水平在不同年龄、性别、饮酒史、HBsAg、HCV、AFP、GGT、肿瘤数目、大小、病理分级、TNM分期、是否合并肝硬化及有无血管浸润组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)MVD值在癌组织中为231.87±110.65,明显高于癌旁组织(146.08±64.68),差异有统计学意义(P<0.001)。MVD水平在不同肿瘤大小及病理分级组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);而在不同年龄、性别、饮酒史、HBsAg、HCV、AFP、GGT、肿瘤数目、TNM分期、是否合并肝硬化及有无血管浸润组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。癌巢内未见D2-40标记的微淋巴管着色,MLD值为0,微淋巴管绝大多数分布于癌巢周围的间质内或癌旁肝血窦周围。(4)经Spearman等级相关分析,发现:CXCL5的蛋白表达强度与MVD水平(r=0.343,P=0.007)、CXCR2的蛋白表达强度与MVD水平(r=0.267,P=0.029)均呈正相关;CXCL5的蛋白表达强度与CXCR2的蛋白表达强度呈正相关(r=0.473,P<0.001)。(5)51例HCC中44例获访,对随访资料进行统计分析后发现:①CXCL5及CXCR2蛋白高、低表达组间比较,复发率及转移率差异均有统计学意义(P<0.05),CXCL5、CXCR2高表达组复发率及转移率均较高;但生存率差异无统计学意义(P>0.05);②M VD水平高、低组间比较,复发率差异有统计学意义(P<0.05),MVD水平高组复发率高;转移率及生存率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论1.HCC中CXCL5、CXCR2的蛋白表达及CXCL5的mRNA表达水平均高于癌旁组织,且两者均与HCC的恶性程度相关,提示CXCL5及CXCR2可能促进了HCC的发生和发展。2. HCC中CXCL5及CXCR2的蛋白表达强度均与MVD水平呈正相关,提示CXCL5及CXCR2促进了HCC内微血管生成。3. HCC中CXCL5、CXCR2的蛋白表达情况与肿瘤的复发及转移密切相关,可用于HCC的预后评估。
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