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目的:本实验组前期基因芯片筛查提示,GTPBP4在肝癌组织中呈现高表达。本研究旨在运用慢病毒载体介导的RNAi技术,使GTPBP4基因达到沉默的效果,进一步观察GTPBP4对肝癌细胞侵袭及迁移能力造成的影响。方法:1、选取人肝癌SMMC-7721细胞和MHCC97-H细胞,利用qRT-PCR和Western Blot法在mRNA水平和蛋白水平筛选出最有效GTPBP4 RNAi慢病毒载体,以用作后续实验,并检测在这两种肝癌细胞中GTPBP4基因沉默的效果;2、用筛选出的最有效GTPBP4 RNAi慢病毒载体感染人肝癌SMMC-7721细胞和MHCC97-H细胞后,分别用Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测GTPBP4基因沉默后对肝癌细胞侵袭能力及迁移能力造成的影响。实验分为3组:正常组、阴性对照组(NC组)、实验组(最有效慢病毒感染组)。3、Western Blot检测GTPBP4基因沉默后MMP-9的蛋白表达的变化。结果:1、通过qRT-PCR和Western Blot法检测,1、2、3号慢病毒在人肝癌SMMC-7721细胞及MHCC97-H细胞中,都能使GTPBP4达到基因沉默的效果(p<0.001),在mRNA和蛋白水平均表明1号GTPBP4 RNAi慢病毒载体沉默效率最佳。2、和相对应的正常组及阴性对照组进行比较,感染GTPBP4 RNAi慢病毒组(实验组)人肝癌SMMC-7721细胞和MHCC97-H细胞的侵袭能力均受到抑制(p<0.001),而正常组与阴性对照组之间的差异并没有统计学意义(P>0.05)。3、和相对应的正常组及阴性对照组进行比较,感染GTPBP4 RNAi慢病毒组(实验组)人肝癌SMMC-7721细胞和MHCC97-H细胞的迁移能力均受到抑制(p<0.01);而正常组与阴性对照组之间的差异并没有统计学意义(P>0.05)。4、GTPBP4基因沉默后,人肝癌细胞SMMC-7721和MHCC97-H细胞的MMP-9蛋白表达水平均明显下降(p<0.001)。结论:慢病毒感染人肝癌SMMC-7721细胞和MHCC97-H细胞后,显著抑制了肝癌细胞的侵袭及迁移能力;下调GTPBP4蛋白表达的同时,MMP-9蛋白表达水平也降低。GTPBP4在肝癌的侵袭及迁移中可能起了重要作用。