牙龈卟啉单胞菌prtC、pgmA基因原核表达系统构建及牙周组织破坏程序与PrtC水平之间的关系

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ASky2009
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目的:构建Pg prtC和pgmA基因原核表达系统并鉴定表达产物的免疫反应性和抗原性,了解慢性牙周炎患者牙周组织破坏程度与龈下菌斑标本中PrtC水平之间的关系.讨论与结论: 1.我们克隆的Pg prtC、pgmA基因核苷酸和氨基酸序列与GeneBank中相应序列的相似性高达98%以上,所构建的pET32a-prtC-E.coliBL21DE3、pET32a-pgmA-E.coliBL21DE3在IPTG剂量低至0.05 mmol/L时也能很好地表达rPrtC和rPgmA,其表达量高达细菌总蛋白的50%左右,表明该研究成功地构建了Pg prtC和pgmA基因高效原核表达系统.2.Western blot结果证实,rPrtC、rPgmA可诱导家兔产生特异性抗体,也可被兔抗Pg全菌抗体所识别,表明rPrtC和rPgmA是有良好的抗原性和免疫反应性的细菌表面蛋白,可作为制备Pg免疫检测试剂盒及疫苗的候选抗原.3.ELISA结果证实,重度慢性牙周炎龈下菌斑中的PrtC水平明显高于轻度慢性牙周炎,提示PrtC和CP患者牙周破坏程度密切相关,表明Pg胶原酶在慢性牙周炎发病过程中具有重要作用.
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