纳他霉素对胶孢炭疽菌的抑制作用及其机理研究

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芒果(Magnifera indicaL.)是一种重要的热带经济水果,其口味酸甜,营养丰富,具有较高的商品价值。但作为典型的呼吸跃变型果实,芒果在后熟期极易受到各种病原菌的侵染,发生采后病害导致果实腐烂,给经济带来严重损失。由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)引发的炭疽病是芒果采后的主要病害,其防治问题成为国内外研究的重点。纳他霉素是食品行业中一种常用生物防腐剂,具有低毒高效、抑菌谱广、无抗药性等优点。本文以纳他霉素为抑菌剂,研究其对胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)和芒果炭疽病的抑制效果,并从细胞生物学和生理生化水平揭示纳他霉素的抑制机理。结果如下:(1)纳他霉素可有效抑制C.gloeosporioides生长,且抑菌效果随浓度增加而增强。通过计算得到毒力回归方程为y=2.6339 x+3.9567,R2=0.985,EC50=2.20 mg L-1;同时纳他霉素可显著抑制C gloeosporioide孢子萌发和芽管伸长。In vivo实验结果显示,纳他霉素显著抑制了损伤接种C.gloeosporioides后芒果果实炭疽病发病率与病斑扩展,表明纳他霉素对芒果炭疽病有较好的防控作用。(2)纳他霉素处理C.gloeosporioiddes菌丝和孢子后,在光学显微镜下可见菌落边缘菌丝生长致密,分支减少,略有肿胀,孢子不能正常萌发且发生肿胀畸变,芽管生长异常;扫描电镜下观测到菌丝发生扭曲变形,凹陷皱缩,局部甚至出现破损断裂;通过透射电镜观察发现,在纳他霉素处理6h后,孢子内线粒体数量减少,泡囊数量增加,处理10 h后细胞受损严重,细胞膜皱缩,出现严重的质壁分离现象,部分细胞器出现变形且分布杂乱。(3)纳他霉素处理后C.gloeosporioides细胞膜渗透性增加,核酸、还原糖泄漏量升高,胞内可溶性蛋白含量增加;此外,纳他霉素处理降低了 C.gloeosporioides细胞膜麦角留醇含量和细胞膜完整性,同时促进丙二醛和活性氧含量的积累,导致细胞膜完整性丧失和线粒体降解。(4)纳他霉素浸泡处理后的芒果果实在常温贮藏过程中的硬度、可滴定酸含量和维生素C含量均高于对照组果实,可溶性固形物含量升高延缓,并一定程度上推迟了呼吸高峰的出现。
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