饲用复合酶高产菌株的筛选、产酶及酶学性质研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:f117f117f117677
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通过透明圈法初筛、摇瓶液态发酵和产酶测定,得到产植酸酶菌株92株。然后通过固态发酵和产酶测定,筛选出一个比较优异的饲用复合酶产生菌株——黑曲霉WP1。黑曲霉WP1在以麸皮为原料的固态培养基中进行发酵时,能够产生丰富的饲用酶系,包括植酸酶、纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶、β-葡聚糖酶、淀粉酶和酸性蛋白酶。黑曲霉WP1固态发酵的适宜条件为:300mL三角瓶中装麸皮20g,水16mL,添加0.3gNaNO3和0.2g SDS,培养温度28℃,培养基初始pH值6.0。在优化培养条件下,黑曲霉WP1在发酵第六天各种主要饲用酶的活力分别为:植酸酶943 U/g,纤维素酶3089 U/g,木聚糖酶651 U/g,淀粉酶508 U/g。以WP1为菌种,经过固态发酵、浸提、超滤浓缩、与赋型剂混合和干燥最终所得酶制剂的植酸酶活力为1000U/g、纤维素酶活力为2817 U/g、木聚糖酶活力为881U/g、果胶酶活力为558 U/g、β-葡聚糖酶活力为55 U/g、淀粉酶活力为1082 U/g、酸性蛋白酶活力为429 U/g(均非在最适条件下测得)。黑曲霉WP1所产植酸酶、纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶的最适反应温度分别为55℃,70℃,50℃和70℃.植酸酶在pH值4.5和2.0有两个酶活力高峰;纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶的最适宜pH值分别为4.0,3.5和5.0。植酸酶在55℃保温1h,酶活力保持率仍然为87%;纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶在50℃时的热稳定性较好,保温2h后,酶活力保留率分别为87%,60%和96%。植酸酶在pH2.0的条件下,40℃保温3h,酶活力保留率高达78.6%。纤维素酶、木聚糖酶和淀粉酶在pH3.0下保温6h后,酶活力基本没有变化。综上,该菌株所产酶类具有良好的热稳定性和耐酸性,能够适应饲料加工和动物胃内环境,适于在实际生产中应用。最后,对复合酶制剂的实际应用性能在蛋鸡养殖场进行了试验。在正常的营养水平上,在蛋鸡饲料中添加饲用复合酶制剂表现出良好的效果,总产蛋率提高了9.67%,正常蛋产率提高了8.15%,优良型蛋的百分数提高了4.3%,平均蛋重提高了1.64%,蛋壳强度平均提高了6.58%,鸡粪中的无机磷含量降低了31.65%。
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