牙本质涎磷蛋白(DSPP)对出生后小鼠下颌骨髁突软骨发育与维持作用的研究

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牙本质涎磷蛋白(Dentin sialophosphoprotein, DSPP)是SIBILING蛋白家族中的一.员。它是一种前体蛋白,其裂解广物分别为牙本质诞蛋白(DSP)和牙本质憐蛋白(DPP)。最初人们认为DSPP仅表达于牙本质,为牙本质特异性蛋白。生理情况下,DSPP在牙本质中主要以DSP及DPP形式存在,这两种蛋白在牙本质形成过程中发挥不同的作用。研究证实,在牙本质中,DSPP裂解形成DSP及DPP是一种激活过程,如果这种裂解过程被阻断,牙本质形成会出现严重的缺陷。目前发现DSPP除表达于牙本质以外,还表达于骨组织及牙骨质等其他矿化组织,以及唾液腺,软骨,肝脏,肺,肾和脑等非矿化组织中。但是DSPP在这些组织中的作用尚不完全清楚。在不同软骨组织中,以及软骨与矿化组织中表达的DSPP存在明显的区别:在牙本质及股骨头软骨中,DSPP主要以裂解形式,即DSP和DPP的形式存在,而在下颌骨髁突软骨中,DSPP主要以非裂解形式,即全长形式存在;蛋白质免疫印迹显示,自牙本质中提取出的DSP与股骨头软骨组织中提取的DSP迁移率不同,与牙本质相比,软骨中DSP可能缺乏某种碳水化合物;此外,软骨组织中的DSPP含量较牙本质低,但明显高于骨组织。提示DSPP在软骨中的作用可能与其在牙本质及骨组织中的作用不同。DSPP对软骨的作用还需要进一步研究。DSPP基因敲除小鼠表现为牙齿发育缺陷:髓腔增大,前期牙本质增宽,矿化降低,髓腔暴露。在正常情况下,虽然DSPP在长骨中表达水平较低,但是在特定的时间点,DSPP即基因敲除小鼠长骨发生中度或严重的骨质变化。虽然DSPP在软骨中的表达明显较骨组织中高,却没有关于基因敲除小鼠软骨表型变化的报道。髁突软骨为继发软骨,其在胚胎来源、个体发生、出生后生长模式及组织学结构上均与初级软骨不同,有自己独特的生物学特点。因为其在下颌骨生长中的重要作用而备受关注。因此,我们以基因敲除小鼠为模型,利用影像学及组织学等方法,通过与野生型小鼠相比较,对下颌骨髁突及髁突软骨进行了观察和检测,初步研究了DSPP对小鼠下颌骨髁突软骨形发育与维持过程中的作用。影像学观察发现,在出生后第3个月及第6个月,基因敲除小鼠下颌骨髁突变薄,形态扁平。而在出生后2个月时,两组之间没有明显的差异。组织学上,出生后1个月及2个月野生型小鼠中,DSPP表达于下颌骨髁突软骨的前成软骨细胞、软骨细胞和肥大细胞层中。基因敲除后,下颌骨髁突软骨厚度减少,主要表现在髁突软骨的关节层和前成软骨细胞层变薄,细胞数目减少。其中,软骨细胞祖细胞的增殖活性降低。除此以外,下颌骨髁突软骨中的细胞外基质蛋白双链蛋白聚糖(biglycan)及II、IX、X型胶原均受到影响。结果表明,DSPP缺失会导致下颌骨髁突软骨发育缺陷。在下颌骨髁突软骨发育过程中,DSPP可能参与调节下颌骨髁突软骨中祖细胞的增殖,细胞外基质的合成。提示DSPP对下颌骨髁突软骨生长和/与维持非常重要。
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