脂肪组织是生物体内最大的储能组织,而且也是十分活跃的脂肪代谢的主要器官。近年来的研究发现,脂肪组织作为一个十分重要的内分泌器官,能够分泌许多细胞因子和细胞因子样分子,如:瘦素(leptin)、脂联素(adiponectin)、抵抗素(resistin)等脂肪细胞因子(adipocytokines)。这些脂肪细胞因子通过内分泌或旁分泌方式对全身各器官系统功能具有重要调节作用,特别是参与调节与肥胖相关的胰岛素抵抗和葡萄糖代谢紊乱。成肌作用是一个复杂并受到高度调控的过程,包括细胞周期阻滞和肌肉特异性转录因子的表达。骨骼肌已经被确定作为一个主要的糖代谢组织。肌细胞内脂质,作为一种重要的能量来源,在运动中提供线粒体氧化所需要的能量。越来越多的研究证明,肌细胞内脂质过度积累与胰岛素抵抗明显呈正相关。研究脂肪-骨骼肌之间的对话(crosstalk)对阐明骨骼肌胰岛素抵抗的发生的机理有重要的意义。脂联素是近年来新发现的一个脂肪细胞因子,脂联素由脂肪细胞分泌后进入血液,以多种形式在血液中循环。脂联素球状区在体内独立存在,与完整的脂联素功能相似。脂联素能够促进肌肉脂肪酸氧化、降低血浆甘油三酯、通过增强胰岛素的敏感性而促进葡萄糖代谢。本研究采用Real-Time PCR和细胞转染等技术,研究了肌细胞成肌过程中细胞脂肪含量情况,脂联素对该过程的影响,促卵泡生成素对AdipoR1的表达调控,猪APPL1和APPL2基因的克隆和生物学特性等进行了研究,结果如下:1.以C2C12成肌细胞为研究模型,添加2%马血清作为诱导分化培养基,用油红O染色的方法对C2C12在成肌过程细胞内脂肪含量进行研究,发现在这个过程中,细胞内脂肪含量急剧减少2.用Real-Time PCR的方法,研究了在C2C12成肌过程中,糖脂代谢相关基因以及脂联素受体相关基因的mRNA表达模式,证明了C2C12成肌过程中,肌细胞脂肪含量的减少是由于脂肪酸氧化增加,合成减少导致;并发现脂联素受体的表达模式与成肌过程有相关性。3.用基因转染的方法,证实脂联素参与了成肌过程脂肪含量减少的过程,并证明了脂联素通过增加脂肪酸氧化途径,而不是水解和合成途径参与上述过程。4.通过同源分析比较,以人的APPL1和APPL2基因序列为参照,运用RT-PCR的方法,获得了猪APPL1和APPL2基因;以猪的心、肝、脾和肺等10个组织样品作为研究材料,通过定量PCR分析获得了猪APPL1和APPL2的组织表达谱;通过电子定位的方法进行APPL1和APPL2的染色体定位。5.用重组人促卵泡生成素刺激体外培养的3T3-L1细胞和C2C12细胞,并用Real-Time PCR的方法,证明了FSH在5ng/ml时能够增加AdipoR1 mRNA表达水平;在NIH3T3细胞中,FSH对AdipoR1的表达具有相反的作用。