超速冻存小鼠卵巢组织的可行性研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangcquan
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目的:探讨超速冷冻和慢速冷冻技术对小鼠卵巢组织冷冻损伤程度的影响.方法:使用HE染色和TUNEL技术分别定量评估冻存后的始基卵泡及初级卵泡的形态学及DNA片断的变化.用免疫组化方法检测冻存复苏后的小鼠卵巢组织中窦前卵泡中Cx43及Cx37的表达.结果:超速冷冻组(A组)中始基卵泡及初级卵泡数为61.25±12.88,慢速冷冻组(B组)为56.90±11.12,新鲜对照组(C组)为83.55±12.33.与新鲜对照组比较,冻存组中卵泡数显著下降(P<0.001),两冻存组之间无显著差异(P>0.05).A、B和C三组中,正常形态的始基卵泡及初级卵泡数与计数卵泡数的比值分别为0.689±0.050、0.723±0.075和0.897±0.184.与新鲜对照组比较,冻存组中正常形态的卵泡数显著下降(P<0.001),两冻存组之间无显著差异(P>0.05).始基卵泡及初级卵泡中的卵母细胞标记阳性的比率:新鲜对照组中为23.53﹪(47/231),超速冷冻组为12.50﹪(28/171),慢速冷冻组为9.88﹪(19/143).在二冻存组之间始基卵泡和初级卵泡的凋亡比率无显著差异(P>0.05),但与对照组相比存在明显差异(P<0.05).Cx43表达阳性率分别为47.10﹪(73/155)、54.60﹪(101/185)、98.73﹪(234/237).Cx37表达阳性率分别为42.86﹪(48/112)、52.04﹪(51/98)、80.10﹪(153/191).在二冻存组之间窦前卵泡中Cx43及Cx37的表达无显著差异(P>0.05),但与对照组相比存在明显差异(P<0.001).结论:超速冷冻和慢速冷冻对小鼠卵巢组织损伤程度的影响无明显差异.超速冷冻可能是一种简便可行、较理想的冷冻技术.
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