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目的:
探讨髓系细胞触发受体—1(Triggering receptor expressed on myeloidcells—1,TREM—1)在大鼠重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)回肠组织和外周血中的变化,并利用LP17特异性阻断TREM—1的信号转导通路,观察大鼠回肠组织白细胞介素—1β(Interleukin—1β,IL—1β)和肿瘤坏死因子—α(Tumor necrosis factor—α,TNF—α)mRNA的表达情况变化及对肠屏障功能的影响。
方法:
(1)雄性Wistar大鼠64只,随机分为假手术组(SO)和 SAP组,每组32只,采用逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型,分别于造模后2h、6h、12h及24h取血和回肠组织。实时荧光定量PCR(real—time fluorescence quantitative PCR,QRT—PCR)检测回肠组织TREM—1mRNA相对表达情况,病理学组织切片观察胰腺和回肠的形态学变化。同时,应用ELISA检测血浆中TREM—1的水平。
(2)雄性Wistar大鼠32只,随机分为SO组、SAP组、SAP+LP17组和SAP+TY17组,每组8只,同法制备SAP大鼠模型。QRT—PCR检测回肠组织IL—1β和TNF—αmRNA的相对表达情况。酶标仪检测血浆D—乳酸浓度和二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性。病理学组织切片观察回肠组织的形态学变化。
结果:
(1)SAP组各时点(2h、6h、12h、24h)血浆TREM—1浓度均高于SO组(P<0.05),同时回肠组织TREM—1mRNA的相对表达量也显著高于SO组(P<0.05)。
(2)术前利用LP17特异性阻断TREM—1后,大鼠回肠组织IL—1β和TNF—αmRNA的相对表达量明显降低(P<0.05),同时血浆D—乳酸浓度和DAO活性也低于SAP组(P<0.05)。
(3)SAP组大鼠回肠组织中性粒细胞浸润伴点状出血,并有淋巴滤泡增生,绒毛出现水肿增粗甚至坏死脱落,而术前经尾静脉注射LP17的大鼠回肠组织病理损伤情况明显减轻,光镜下见肠粘膜排列相对整齐,部分上皮绒毛脱落,有轻度的粘膜和粘膜下层分离。
结论:
(1)TREM—1参与了SAP时的“过度”炎症反应,在SAP早期继发肠屏障功能障碍(Intestinal barrier dysfunction,IBD)的过程中,TREM—1在大鼠外周血和肠组织中均高表达,说明TREM—1早期即促进下游炎症因子的释放,在IBD的发生发展过程中起重要作用。
(2)TREM—1特异性阻断剂LP17能有效抑制初级炎症因子如TNF—α和IL—1β的表达,并有效改善肠屏障功能的损害程度。