苦参不同部位化学成分及含量差异研究

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苦参为豆科槐属植物苦参Sophora flavescens Ait的干燥根,是常用中药,其味苦,性寒,具有清热燥湿,杀虫利尿等功效。其主要活性成分为生物碱和黄酮两大类化合物。迄今,已从苦参中分离出生物碱类39个,黄酮类122个成分。苦参因其确切的疗效,在临床得到了广泛的应用。目前,在国内外以苦参单味药或复方制成的中成药制剂已有166种;另外,苦参在农业、畜牧业和日用品中也同样得到了广泛的应用,对苦参野生资源需求的快速增长,致使野生苦参资源挖掘殆尽。为解决这一问题,苦参人工种植、GAP种植等已大规模展开。苦参作为多年生植物,栽培3年以上的根才能供药用,而每年产生的生物量大的地上部分则作为农业废弃物扔掉。为了综合利用苦参丰富的地上部分资源,本研究针对苦参不同部位(根、茎、叶、花、豆荚、种子)的成分及其含量进行研究,以挖掘其可能的开发价值。一、UPLC-qTOF-MS/MS快速鉴别各部位的化学成分采用UPLC-qTOF-MS/MS法对苦参不同部位的成分进行系统研究,共指认了156个化合物,包括28个生物碱、98个黄酮、29个齐墩果烯型三萜皂苷和1个木脂素类,其中53个为首次在苦参中检出,22个可能为新化合物。药用部位(根)与地上各部位的成分差异较大。生物碱类在苦参各部位中的成分组成基本相同;根中黄酮类除了含有异戊烯基二氢黄酮外,尚有较大量的异黄酮苷;茎、叶以异黄酮苷为主;花中以黄酮醇苷为主,其次是异黄酮苷;根与地上各部位的黄酮苷类的糖种类不同。此外,花和种子中还存在大量的三萜皂苷。二、苦参不同部位两类成分的含量差异生物碱和黄酮为苦参中主要的两大类有效成分。采用紫外法测定总黄酮,采用酸性染料法测定总生物碱,采用HPLC同步测定5个生物碱的含量,以多指标综合评价苦参不同部位化学成分的含量差异。结果表明:苦参不同部位总黄酮和总生物碱含量差异均较大。根、花和叶总黄酮的含量相似,在生物碱含量上,种子与药用部位的含量接近,其次为花,而其它部位的生物碱含量很低。三、苦参提取物质量标准参照《中国药典》2010版附录相关方法,对不同批次苦参提取物的水分、灰分进行测定;以三叶豆紫檀苷、槐属二氢黄酮G、氧化苦参碱和氧化槐果碱为指标,采用TLC法进行定性鉴别;采用HPLC法测定氧化苦参碱、苦参碱、氧化槐果碱与槐果碱的含量;以槐属二氢黄酮G为指标,采用UV法测定总黄酮的含量。结果表明薄层色谱斑点清晰,分离度好;苦参提取物中含氧化苦参碱、苦参碱、氧化槐果碱和槐果碱的质量分数分别为3.87%~11.06%、0.97%~4.33%、1.30%~2.59%和0.26%-1.14%,含总黄酮的质量分数为3.88%7.93%。首次建立的苦参提取物质量控制方法通过了第三方药检机构的复核验证,表明所建立的方法重复性好,标准可行。
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