新型SERS纳米探针用于一氧化氮和透明质酸酶的分析检测研究

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近年来,表面增强拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering,SERS)因其在特异性、选择性和灵敏性方面具有独特的优势,使其已经成为生物、化学分析检测中强有力的分析方法之一。随着SERS基底的不断发展、改善,基于SERS的生物化学传感研究不断走向更高的临床诊断应用和即时检测应用等。因此,基于SERS应用于生物传感领域的独特优势,以发展简便、高灵敏的生物医学传感检测方法为出发点,本论文主要开展了以下两个工作:(一)基于多孔二氧化硅包裹的金-银合金纳米颗粒(AuAg@pSiO2NPs)的SERS纳米探针用于活细胞中一氧化氮(NO)的比率型成像检测研究。本章以AuAg@pSiO2NPs为SERS基底,通过Au-S键将3,4-二氨基苯硫酚(DABT)吸附固定于金银合金纳米颗粒表面,作为NO的识别分子,形成DABT-AuAg@pSiO2NPs SERS纳米探针。当DABT与NO反应后,在804 cm-1处出现一个新的拉曼峰,而1064 cm-1处的拉曼峰不变,从而可实现对NO的比率型检测。本SERS纳米探针具有良好的生物相容性和化学稳定性,并且还具有优越的SERS增强能力和良好的信号重现性。(二)一种新的比率型SERS传感方法用于尿液中透明质酸酶的分析检测研究。4-巯基苯甲腈(TBN)和4-巯基苯乙炔(TPA)分别在2220 cm-1和1974 cm-1处有拉曼信号峰,且均位于细胞拉曼静默区。本章中,首先制备了TBN修饰的带强正电荷的金纳米棒SERS纳米探针(TBN-AuNRs)和TPA修饰的显电中性的金银合金纳米颗粒SERS纳米探针(TPA-AuAgNPs)。将这两种纳米探针混合,构建了一种基于阳离子AuNRs与聚阴离子透明质酸(HA)之间静电作用特性的新型比率型SERS纳米传感体系,并用于透明质酸酶(HAase)的分析检测研究。在HAase的存在下,HA被降解,TBN-AuNRs不能发生团聚,因而TBN的拉曼信号较弱;不存在HAase时,TBN-AuNRs会以HA为介导发生团聚,TBN拉曼信号增强;而TPA-AuAgNPs的拉曼信号始终保持不变,从而可实现HAase的比率型检测。与其它纳米传感器相比,我们构建的这种比率型SERS纳米传感体系具有简单、灵敏、及良好的信号重现性等特点,检测范围在5-70 U/mL,刚好可以用于区分健康和癌症患者尿液中HAase的含量水平。
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