论文部分内容阅读
目的：前期研究发现miR-30a-5p在胃癌细胞株中低表达,并初步证实XIAP为miR-30a-5p的靶基因。本课题旨在探讨XIAP在人胃癌组织和胃癌细胞中的表达情况,以及下调XIAP后对胃癌细胞凋亡、增殖和细胞周期的影响及其可能的作用机制。方法：收集54例胃癌患者的组织标本及其临床资料,用qRT-PCR法检测组织标本中XIAP mRNA的表达情况；以人正常胃黏膜上皮细胞GES-1为对照,采用qRT-PCR法和Western Blot检测胃癌细胞AGS、SGC-7901、MGC-803、BGC-823中XIAP mRNA和蛋白的表达情况。人工设计合成两对XIAP siRNA干扰序列瞬时转染以上5株细胞,以si-NC为对照,用同上方法检测XIAP mRNA和蛋白的表达水平及干扰效率。Annexin V/PI法、CCK8法及流式细胞术分别检测沉默XIAP后细胞凋亡、增殖及细胞周期的变化。结果：XIAP在胃癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.001),且与免疫组化标记物Her-2的表达有相关性(P<0.01)。在胃癌细胞株AGS、SGC-7901、 MGC-803、BGC-823中XIAP蛋白的表达均高于正常胃黏膜上皮细胞GES-1(P<0.05),但在AGS细胞中XIAP mRNA的相对表达量低于GES-1。瞬时转染以上5株细胞后,XIAP mRNA和蛋白的表达均较阴性对照序列组(si-NC)降低(P<0.05/P<0.01),干扰效率显著。下调XIAP后可增加胃癌细胞的凋亡率,呈时间依赖性抑制胃癌细胞的增殖(P<0.05/P<0.01),并诱导G0/G1和(或)G2/M期细胞阻滞。结论：XIAP mRNA在胃癌组织中表达上调,且与免疫组化标记物Her-2的表达有相关性。XIAP蛋白在胃癌细胞株中表达上调,但与细胞内XIAPmRNA的表达水平有差异。下调XIAP后,可明显促进胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,诱导细胞发生G0/G1和(或)G2/M期细胞阻滞。