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Neuropeptide Y(NPY)是由36个氨基酸组成的单链活性多肽,在生物体内参与多种生理活动,包括对摄食行为的调节,促进下丘脑的促性腺激素释放激素的分泌,以及促进垂体细胞生长激素的释放等等。
Ghrelin是目前已知的唯一的一种具有食欲促进作用的消化道分泌激素,并广泛参与生物体内多种生理功能,包括促进摄食行为,促进growthhormone(GH)的释放。此外Ghrelin还参与体内能流代谢,降低耗氧量,促进能流正平衡;调节糖脂代谢,增加食物中脂肪摄取和体内脂肪的合成;水的摄入调节,以及机体免疫等方面的功能。
本实验在开始时,已获得根据斜带石斑鱼自身序列合成的NPY和Ghrelin的活性肽。在此基础上,本文通过腹腔注射以及投喂的方法探讨这两种活性肽对于石斑鱼生长以及摄食行为的影响。在腹腔注射实验中,给斜带石斑鱼分别注射生理盐水、溶于生理盐水的NPY(200ng/g体重)以及溶于生理盐水的Ghrelin(200ng/g体重)。在注射后的1.5小时,3小时以及6小时分别采集下丘脑、垂体以及肝脏等组织,并通过Real-Time PCR检测NPY、GH、growthhormone-releasing hormone(GHRH)以及insulin-like growth factor-1(IGF-1)的表达量。结果表明,腹腔注射NPY以及Ghrelin均可促进斜带石斑鱼下丘脑NPY以及垂体GH的表达。垂体GH表达量分别在实验鱼注射NPY1.5h和注射Ghrelin3h后显著升高,其中Ghrelin促进GH表达量增加的效果更为显著,可能与GHRH的参与有关。
随后,通过后喷涂方法将两种活性肽添加到饲料中,开展为期8周的养殖实验。每组饲料设置了5个平行组,对斜带石斑鱼采取一天两次饱食投喂。结果表明,NPY与Ghrelin组摄食量以及增重率比对照组有提高,但均未达到显著性。全鱼等营养组成方面没有显著性差异,肝体比、肠脂比等均没有出现显著差异。这可能与NPY和Ghrelin的添加的剂量有关,实验用鱼初次重量均高于前人实验的终重,可能需要更高剂量的NPY和Ghrelin,或者需要更长的投喂时间。通过Real-timePCR对下丘脑的NPY、GHRH、orexin和垂体的GH检测,结果表明NPY组的NPY以及GHRH的表达量有显著提高,证明了NPY可以通过摄食被肠道吸收,并参与石斑鱼生理功能的调节。