抗水稻细菌性条斑病芽孢杆菌菌株的选育研究

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanson117
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解淀粉芽孢杆菌物种丰富,广泛分布在土壤和植物表面。近年来随着解淀粉芽孢杆菌具有抑制多种植物病原菌能力的发现,使其成为了具有生物农药发展潜力的微生物。从湖南、广西等地水稻田采取土壤样品,经分离、纯化得到9763株芽孢杆菌,采用牛津杯法测定分离菌株对水稻细菌性条斑病菌的拮抗能力,筛选得到具有拮抗能力的芽孢杆菌310株,经过多次重复筛选,最终得到拮抗能力强且稳定的菌株JF48,其对水稻细菌性条斑病的抑菌圈直径达37±3 mm。通过对该菌株的形态、生理生化以及16SrDNA序列进行分析,鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。通过摇瓶培养试验,研究了不同碳源、氮源、无机盐种类、摇瓶装液量、转速、起始pH、发酵培养温度、接种量对解淀粉芽胞杆菌JF48菌株芽孢产量及芽孢转化率的影响。然后通过Plackett-Burman试验从单因素试验得到的最佳因素中筛选出三个显著影响因子,分别为玉米粉、豆粕粉、发酵培养温度。最后,经响应面法优化后的最佳发酵培养条件为:玉米粉14.69g/L、豆粕粉 9.54g/L、CaC122g/L、NaCl5g/L、MgS04lg/L、装液量50mL/250mL、转速为200rpm、初始pH7.5、温度38℃、接种量1%。在此发酵培养条件下,芽孢产量达到3.6×109cffu/mL,与优化前相比提高了105 倍。通过单因素试验,确定解淀粉芽孢杆菌JF48菌株可湿性粉剂的最佳配方如下:载体硅藻土 10%、助剂聚乙二醇(PEG-8000)10%、稳定剂K2HPO42%、紫外保护剂抗坏血酸(VC)0.1%。使用该配方制成的解淀粉芽孢杆菌JF48菌株的可湿性粉剂芽孢含量为5.6×109cfu/g,悬浮率为76%,湿润时间为56s。使用JF48菌株培养液进行盆栽防治试验,试验组的水稻发病等级均明显低于对照组。这表明解淀粉芽孢杆菌JF48菌株对水稻细菌性条斑病具有明显的防治效果。
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