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目的：调查我院2007年9月至2009年9月间暴发流行的77株鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制，重点探讨D类β内酰胺酶编码基因及其上游插入序列IS对鲍曼不动杆菌亚胺培南耐药的影响。同时进行分子流行病学调查。方法：通过PCR检测blaOXA-51-like基因的方法从鲍曼不动杆菌复合体中鉴定出鲍曼不动杆菌；采用AST-GN09药敏卡，通过Vitek2compact系统对鲍曼不动杆菌进行药敏实验；通过PCR方法检测77株鲍曼不动杆菌内blaVIM、blaIMP、blaSIM和blaNDM-1等金属β内酰胺酶编码基因，以及blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like和blaOXA-58-like等D类苯唑西林酶编码基因，并对其上游插入序列ISAba1进行检测；采用脉冲场凝胶电泳（Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE）、多位点序列分型（Multiple Locus Sequence Typing, MLST）和国际克隆分型等方法进行分子流行病学调查。结果：1.77株鲍曼不动杆菌中有57株对亚胺培南耐药，3株对亚胺培南中度敏感，17株对亚胺培南敏感；2.所有菌株内均未检测到各类金属β内酰胺酶编码基因；57株亚胺培南耐药菌株中均检测到blaOXA-23-like类基因，且在其上游均检测到ISAba1插入序列；20株亚胺培南非耐药菌株中仅有两株检出blaOXA-58-like基因，且该两株鲍曼不动杆菌blaOXA-51-like上游检测出了ISAba1。77株菌中均未检测到blaOXA-24-like基因。3. PFGE分型结果显示：77株鲍曼不动杆菌分属A-F6种克隆型别，A克隆和B克隆为本次PFGE分型主要克隆型别。其中，A克隆共有4种亚克隆，共包括30株菌株；B克隆共有5种亚克隆，共包括37株菌株。4.从六种PFGE克隆型别的每一型别中分别选取1株代表菌株进行MLST分型，共鉴定出ST75（A克隆）、ST137（B克隆）以及ST17（E克隆）等型别；同时，新发现了两种ST型别： ST N1（C及F克隆）和ST N2（D克隆）。5.欧洲克隆分型结果显示：本次调查菌株中ST75（A克隆）、STN1（C及F克隆）属于欧洲克隆II型菌株。结论：引起本次院感爆发的77株鲍曼不动杆菌多为亚胺培南耐药菌株（74%，57/77），主要克隆为A克隆（ST75、欧洲克隆II型）与B克隆（ST137），且其对临床常用碳青霉烯类抗生素亚胺培南的耐药多与blaOXA-23-like基因及其上游插入序列ISAba1的出现密切相关。