三个水稻叶色突变体的鉴定与基因克隆

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xryanqd
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
突变体是功能基因组学研究的重要材料。以粳稻品种(Oryza sativa L.subsp.japonica)日本晴为受体,利用农杆菌介导的遗传转化方法,我们实验室构建了由20000多个独立转基因株系组成的T-DNA插入突变体库。从该突变体库T1代群体中寻找性状可见突变体,发现了三个叶绿素缺陷突变体:低温敏感的叶色突变体ltc、缺叶绿素b突变体cbl和高温敏感叶色突变体cde(t)。本论文针对这三个突变体,开展了性状鉴定、遗传分析、基因克隆和初步的功能验证的研究。主要结果如下: 1.ltc突变体是低温敏感的叶绿素缺陷突变体,在限制性温度(23℃或更低温度)下,突变体叶片出现大面积白化的现象,色素含量测定显示,突变体叶绿素和类胡萝卜素含量明显低于野生型植株,然而生长在高温条件(32℃)下,该突变体和野生型植株叶绿素含量差别不大;遗传分析表明该突变是单基因控制的隐性突变。 2.PCR和潮霉素抗性分析显示突变体ltc突变性状和T-DNA插入共分离;通过TAIL-PCR获得了插入位点的旁邻序列,序列分析显示T-DNA插入到一个H+-ATPase基因的第一个外显子上。构建了ltc基因的干涉载体,遗传转化后获得了叶绿素缺陷表型的T0代转基因植株,这些植株和相同温度下的ltc突变体表型相似。 3.cbl突变体是完全缺乏叶绿素b突变体,突变体具有叶黄,半矮化和分蘖少的特点;遗传分析显示该突变性状是由一对隐性核基因控制的;突变体和T-DNA的共分离分析表明叶色突变不是T-DNA插入引起的。 4.构建了cbl基因的定位群体,通过大量cbl位点附近分子标记的获得,构建了cbl位点的高密度物理图谱,最后将cbl基因定位于第10染色体分子标记IDJ9和RM496之间23kb的区段:序列分析显示叶绿素a氧化酶基因是cbl基因的候选基因,构建了叶绿素a氧化酶基因的干涉载体,遗传转化后获得了叶色黄绿的T0代转基因植株。 5.cdel(t)突变体是高温敏感的叶绿素缺陷突变体,该突变体在非限制性温度下(23℃或更低的温度)表型正常,然而在限制性温度下(26℃或更高的温度)呈
其他文献
临摹与写生是学习工笔花鸟的重点,然而在目前多数高等院校工笔花鸟教学中,临摹教学仅为绘画技法的传承,写生教学缺乏正确的引导。针对这一现状,文章基于教学第一线与绘画学习
火电厂为了保障电力生产可靠连续性需要连续不断组织好材料、设备以及备件备品的供应活动,这不仅仅可以促使企业生产正常化还能促使企业生产高效化,而物资管理是使火电厂各环节
溶磷微生物是农业生态系统中一类重要的土壤微生物,在农业土壤和自然土壤中广泛存在。由于不同溶磷微生物对某一特定的环境适应存在差异,导致它在不同条件下的溶磷功能发挥显
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
对纽约的城市轨道交通网络发展和城市空间形态演变过程进行梳理,分别从低速轨道交通、地铁、市郊铁路三个方面论证纽约城市发展过程中城市轨道交通所形成的交通供给是如何相
<正>本刊讯:2016年黔桂国家白酒品酒师职业资格鉴定培训班于2016年10月24日至10月28日在贵阳市举行。本次培训班是依照贵州省酿酒工业协会和广西酿酒协会联合下发的"关于开展
“一带一路”倡议的提出,是马克思主义中国化的创新。随着全球化的深入发展,“一带一路”倡议以新的政治、经济、文化等连结方式,推动着中国乃至周边国家的发展。在提出建设
获得与缺失变异(PAVs,presence/absence variants)是一种通过缺失和插入引起的基因组结构变异,直接影响到基因组大小和基因数目变化,带来的基因组变异的尺度远远大于单核苷酸多态
车床主轴结构拆装实验是机械制造基础课程的一个重要实验,其目的是让学生了解车床主轴系统的组成与布局,掌握主轴的传动方式与结构.基于UGNX平台完成了该虚拟拆装实验的开发,