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第一部分重症急性胰腺炎大鼠模型的建立及其血管内皮功能变化目的建立易复制,可操作性,稳定性好的重症急性胰腺炎(SAP)动物模型,观察在SAP病理状态下血管内皮细胞(VEC)形态学、功能学改变。方法健康雄性SD大鼠64只,随机分为假手术组(C组),SAP组(A组),每组32只。C组开腹后只翻动十二指肠及胰腺后关腹；A组胰胆管内逆行输注1.5%脱氧胆酸钠制备SAP模型。术后6、12、24、48h分别处死大鼠(每个时点8只),观察胰腺组织形态学改变并进行评分；胰腺腺泡细胞及血管内皮细胞超微病理改变；检测血清淀粉酶含量；检测肠系膜上动脉内皮依赖性舒缩功能。结果1.A组大鼠胰腺组织出现炎细胞浸润、腺泡细胞水肿、颗粒样凝固性坏死,小叶结构破坏等典型的坏死性胰腺炎的病理改变,胰腺病理学评分较C组显著升高(P<0.05)；并且随着时间延长,病变逐渐加重(P<0.05),A组于造模6小时光镜下观察到胰腺内血栓形成；C组胰腺组织形态正常。2.透射电镜下观察C组胰腺腺泡细胞及内皮细胞亚细胞结构基本正常；A组腺泡细胞肿胀,粗面内质网显著扩张,细胞内见大量空泡；A组胰腺内血管内皮细胞褶皱,肿胀,基底膜变疏松,胞膜破损甚至细胞死亡脱落。3.A组各时间点血清淀粉酶显著高于C组(P<0.05),并于12h达高峰,与同组24h、48h水平无显著差异；C组组间无差异。4.A组血管内皮舒张度6h即较C显著下降(P<0.05),之后随着时间的推移,缓慢下降；6h、12h血管内皮收缩反应度与C组无明显差异,至24h后明显降低(P<0.05)；C组血管内皮依赖性收缩反应度正常。结论1.应用逆行性胰胆管注射1.5%脱氧胆酸钠可以制备SAP动物模型,造模后大鼠血清淀粉酶改变,病理切片及透射电镜下观察符合SAP病理及超微病理改变。2.AP发病的早期即发生血管内皮损伤的形态学和功能学改变。重症急性胰腺炎血管内皮功能障碍发生机制及影响因素目的探讨重症急性胰腺炎血管内皮功能障碍的发生机制及影响因素。方法64只雄性SD大鼠,随机分为假手术组(C组),SAP组(A组),每组32只,按第一部分方法制作动物模型。建立模型后分别于6h、12h、24h、48h处死大鼠,取下腔静脉血用ELISA检测血清TNF-α、ET-1含量；用比色法检测胰腺组织MDA含量及MPO活力；取胰腺组织用RTQ-PCR检测胰腺组织ICAM-1、VCAM-1、E-selectin基因表达；用Western-blot检测胰腺组织ICAM-1、VCAM-1、E-selectin蛋白表达。结果1.A组大鼠血清TNF-α水平早期即迅速升高,并且随着时间的推移,呈逐渐增高趋势；A组大鼠血清ET-1水平在6h即显著升高,并持续升高至12h达高峰,至48h仍维持较高水平,各时点TNF-α、ET-1均较C组显著升高(P<0.05)。2.与C组同一时点相比较,A组胰腺组织MDA、MPO含量显著增高(P<0.05)并且呈现随时间延长而增加的趋势。3.C组大鼠胰腺组织中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin基因低水平表达；A组大鼠胰腺各时点ICAM-1基因表达较C组显著增高(P<0.05),于12h达峰值后持续高表达,12h,24h,48h表达量无显著差异；A组各时点VCAM-1基因表达较C组显著增高(P<0.05),6h后表达增高迅速,12h达高峰,并持续高表达至48小时；E-selectin各时点基因表达较C组显著增高(P<0.05),两组组间各时间点表达无明显差异。4.ICAM-1蛋白在C组中仅少量表达,A组中6h表达较C明显升高,12h,24h,48h呈较高表达；VCAM-1蛋白在C组中微量表达,A组造模6h后显著增高,24h达峰值,48h表达水平仍较高；E-selectin在C组中仅少量表达,A组中6h其表达量即明显增高,并且呈高水平表达维持至48h。结论SAP时血清TNF-α、ET-1水平,胰腺MPO活力,MDA含量及ICAM-1、VCAM-1、E-selectin基因及蛋白表达显著增高；炎性因子、氧化应激及粘附分子共同参与了SAP血管内皮功能损伤的病理过程。低分子肝素对重症急性胰腺炎大鼠的保护作用目的探讨低分子肝素对SAP大鼠的保护作用。方法96只雄性SD大鼠随机分为假手术组(C组),急性坏死性胰腺炎组(A)组,低分子肝素干预组(G组),每组32只,按第一部分实验方法制作动物模型,C组于SAP造模后给予皮下注射低分子肝素(10U/100g)。于造模后6h、12h、24h、48h处死大鼠,观察胰腺病理改变并评分；检测血清淀粉酶含量；检测血清TNF-α、ET-1含量；检测胰腺组织MDA含量及MPO活力；检测胰腺组织E-selectin mRNA及蛋白表达水平；检测肠系膜上动脉内皮依赖性舒缩功能。结果1.G组各时点胰腺病理学评分较A组显著下降(P<0.05)；2.G组各时点血清淀粉酶较A组显著下降(P<0.05)；3.G组血清TNF-α及ET-1水平较A组显著下降(P<0.05)；4.G组大鼠各时点MDA水平较A组大鼠同时点无显著差异,较C组大鼠同时点胰腺MDA含量高(P<0.05)；G组大鼠各时点MPO水平较A组大鼠同时点明显降低,6h、12h较C组同时点差异无显著性,24h、48h较C组升高(P<0.05)；5.G组各时点E-selectin mRNA及蛋白表达水平较A组显著下降；6.G组大鼠血管内皮舒张反应度6h、12h较A组升高(P<0.05),与C组无显著差异,24h,48h较A组同一时间点无显著差异,较C组同一时间点降低(P<0.05)；G组大鼠6h、12h血管内皮收缩反应度与C组、A组无显著差异,24h较C组无显著差异,较A组升高(P<0.05),48h较C组降低,较A组升高(P<0.05)。结论低分子肝素能明显降低大鼠坏死性胰腺炎血清淀粉酶、TNF-α及ET-1水平,下调粘附分子表达,降低MPO活力,改善血管内皮功能及胰腺病理损伤。