牡丹皮对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织的保护作用及机制研究

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目的观察牡丹皮对单侧输尿管梗阻大鼠(unilateral uretcral obstruction,UUO)肾组织的保护,初步探讨牡丹皮防治肾纤维化作用机制。方法将清洁级雄性SD大鼠,采用单侧输尿管结扎方法建立肾纤维化大鼠模型,设立UUO模型组、牡丹皮低剂量组、牡丹皮中剂量组、牡丹皮高剂量组、卡托普利组,共分为5组,每组10只,另10只SD大鼠设为假手术组。并于造模成功后,牡丹皮低剂量组、牡丹皮中剂量组、牡丹皮高剂量组、卡托普利组分别给予相应药物灌胃治疗21天,假手术组和UUO模型组同时予等量生理盐水灌胃。处理动物前收集24h尿液。实验第22天解剖大鼠,大鼠腹主动脉取血,检测大鼠血清BUN、Scr含量;取左侧肾脏,HE、Masson染色观察肾脏组织病理学改变;ELISA检测大鼠血清和肾脏组织FN、Col-Ⅳ含量;免疫组化法检测肾脏组织TGF-β1、α-SMA和E-cadherin蛋白表达。结果1.与假手术组比较,UUO模型组大鼠血清BUN、Scr和24h U-TP含量均明显升高。连续21天给予牡丹皮和卡托普利后,与UUO模型组相比,牡丹皮低、中、高剂量组和卡托普利组大鼠BUN、Scr和24h U-TP均有显著下调,差异有统计学意义。2.与假手术组比较,UUO模型组大鼠血清和肾脏组织FN、Col-Ⅳ含量显著升高。连续21天给予牡丹皮和卡托普利后,与UUO模型组比较,牡丹皮低、中、高剂量组和卡托普利组大鼠血清及肾脏组织FN、Col-Ⅳ含量均显著下调,差异有统计学意义。3.免疫组化法检测结果表明,假手术组大鼠肾组织少见TGF-β1、α-SMA蛋白表达,而可见大量E-cadherin蛋白表达。UUO模型组大鼠肾组织具有明显的TGF-β1、α-SMA阳性染色且阳性染色面积和累积光密度值显著升高,而少见E-cadherin蛋白表达。相对于UUO模型组,牡丹皮低、中、高剂量组和卡托普利组大鼠肾组织TGF-β1、α-SMA蛋白表达、阳性染色面积和累积光密度值均明显降低,而E-cadherin蛋白表达则显著升高。结论UUO模型大鼠存在明显的肾间质纤维化现象,而牡丹皮对UUO模型大鼠有保护作用,可延缓肾间质纤维化的进程,其作用机制可能与降低大鼠血清和肾组织FN、Col-Ⅳ含量,抑制肾组织TGF-β1、α-SMA蛋白表达,促进E-cadherin蛋白表达有关。
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