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前言 角膜疾病是主要的致盲眼病之一,在所有角膜疾病中,细菌性角膜溃疡和角膜热烧伤比较常见。大量文献表明,细菌性角膜溃疡和角膜热烧伤导致角膜正常结构的破坏中起主要作用的蛋白水解酶是基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase简称MMPs)。长期以来,人们一直都在积极研究细菌性角膜溃疡和角膜热烧伤中基质金属蛋白酶的表达形式特征及其作用机制,不断探求理想的内部或外部的基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs),以便将其损害降低到最小程度。目前的研究虽然取得了较大的进展,但现有研究多局限在动物研究。本实验利用人角膜观察角膜细菌性溃疡性疾病、角膜热烧伤性疾病中MMP-2、MMP-9的表达,探讨它们在研究疾病中的作用,为将来临床合理的应用TIMPs来治疗相关角膜疾病提供必要的理论依据。 实验材料和方法 一、材料:收集临床角膜移植供体角膜10例,细菌性角膜溃疡、角膜热烧伤角膜各10例。主要试剂与器材有鼠抗人MMP-2、-9单克隆抗体、生物素标记的羊抗兔IgG、抗鼠IgG及SP试剂盒,计算机图像分析系统等。 二、方法:-80℃保存角模标本,角膜标本免疫组化染色,光镜下观察MMP-2、MMP-9的表达及分布,图像分析系统半定量分析结果并进行统计学分析并且观察同一疾病不同病程的标本中两种酶的表达趋势。 实验结果 MMP-2、MMP-9在细菌性角膜溃疡和角膜热烧伤中均有表达,统计学分析相对于正常人角膜均具有统计学意义。MMP-2主要分布于角膜基质层,MMP-9主要分布于角膜上皮层和基底膜附近。在细菌性角膜溃疡中,MMP-2在不同病程中表达不同,在病程小于30天的病例较高,随着病程的延长,MMP一2呈下降趋势,MMP一9的变化不明显;在角膜热烧伤中,MMP一2随着病程的发展,先呈现逐渐增高趋势后逐渐下降;MMP一9在患病初期表达较高,后期渐下降。讨论 细菌性角膜溃疡和角膜热烧伤均为角膜胶原降解导致的破坏性角膜疾病,在此过程中MMPs起主要作用。其中MMP一2、一9分布最广,研究最多。在细菌性角膜溃疡和角膜烧伤中发挥重要作用。 本研究显示:细菌性角膜溃疡和角膜热烧伤中,MMP一2、一9阳性表达与病程和作用底物的不同有关,阳性表达的量与作用底物的损害程度正相关,随着病程的延长,两种酶的表达呈下降趋势。两种酶在研究疾病的发病过程中有重要作用。为临床应用可能的药物治疗提供了初步的理论依据。由于条件所限,对同一疾病不同时期及两种疾病间同一时期两种酶的表达还有待进行确切的研究,期待为临床相关的治疗提供更准确的理论依据。结论 MMP一2、MMP一9在角膜细菌性溃疡和角膜热烧伤的过程中起着重要作用,与作用底物分布相一致,与病变的程度和部位相一致。