由于温室效应不断推高全球气温,植物不可避免的要受到高温的影响,温度逐渐成为影响植物生理过程的重要因素之一。所以,科学研究目前亟待解决的关键问题是增强植物的耐热性。MicroRNA （miRNA）是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链小RNA分子,它在转录后水平调节靶基因表达。MicroRNA作为基因表达调控的新成员正不断受到科学家们的重视,它能够在转录后水平对基因表达实施准确的调控,与此同时最新科研结果显示microRNA在植物响应逆境胁迫中起着十分关键的作用。本研究通过比较不同方法提取拟南芥总RNA的效果,以及针对不同品种拟南芥热胁迫相关的microRNA的筛选及表达情况差异进行了分析,具体的研究结果如下：1、热胁迫相关microRNA的生物信息学分析本研究通过数据库寻找拟南芥热相关的microRNA,并利用在线工具预测了响应热胁迫microRNAS。MicroRNA前体应该具有典型的茎环二级结构,不能有大的环和凸出。成熟的microRNA应该在茎环的一个臂上,并且能检测到它的表达。利用生物信息学手段,通过在线数据库筛选出4个可能参与到拟南芥响应热胁迫过程的microRNA （ath-MIR414、ath-MIR415、ath-MIR837-5p、 ath-MIR10564-akr）。2、3种总RNA提取方法的比较分析本研究分别采用改良CTAB法、改良热酚法以及Trizol法分别提取拟南芥总RNA。比较3种提取方法的效果,结果证明改良的CTAB法与改良热酚法没有提取到高质量并且完整性好的总RNA,提取后的RNA沉淀中存在多酚类杂质,或RNA被降解的情况严重。对比下Trizol法提取的总RNA的质量最高并且完整性好,最适合进行后续研究试验。3、半定量检测4种热胁迫相关rnicroRNA本研究根据4种热胁迫相关的microRNA序列设计特异性茎环引物进行stem-loop RT-PCR,检测了相应的4中热胁迫相关的microRNA存在于拟南芥中4、半定量检测4种热胁迫相关InicroRNA在突变型和野生型拟南芥中的表达差异情况本研究在逆转录过程中对热胁迫相关的microRNA进行Poly（A）加尾反应,进而可一步合成cDNA。根据One Step PrimeScript miRNA cDNA Synthesis Kit试剂盒的原理,设计相应的：liRNA specific forward primer,分别检测突变型拟南芥和野生型拟南芥中的4种热胁迫相关microRNA在不同热处理时间下的表达差异情况。结果揭示了经过BBX19基因过量表达后的拟南芥热胁迫相关的基因表达水平要高于野生型拟南芥热胁迫相关的基因表达水平。