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目的:糖尿病肾病的病理改变包括肾小球硬化及肾小管间质纤维化。而肾小管间质纤维化主要表现为肾小管上皮细胞的损伤和细胞外基质蛋白的沉积。最近研究表明,鞘氨醇激酶2（SphK2）信号在调控肾脏纤维化病理进程中发挥着重要作用,但相关研究主要集中在早期急性肾损伤和纤维化方面,而SphK2在糖尿病引起的慢性肾脏并发症中的作用及机制尚不明确。内质网应激和炎性小体介导的肾小管损伤在糖尿病肾病中发挥重要调控作用。最新研究报道,SphK2介导内质网应激引起的肝脂肪样变及胰岛素抵抗。但SphK2与炎性小体之间是否存在联系,至今未有报道。本研究旨在探讨SphK2是否通过调节内质网应激和炎性小体激活参与糖尿病肾病的疾病进程,为将SphK2开发成糖尿病肾病的干预靶点提供前期实验基础。方法:1、本研究通过采用Leprdb/db小鼠模型,在动物水平上通过检测肾功能相关生化及病理学指标、肾小管损伤分子（KIM-1）与纤连蛋白（FN）的蛋白表达情况,来探索SphK2与糖尿病肾病的相关性。2、通过免疫荧光共定位寻找SphK2主要集中在哪类肾固有细胞中表达。3、在细胞水平上,采用大鼠肾小管上皮细胞系（NRK52E）,分别转染SphK2 siRNA和SphK2质粒,检测KIM-1与FN的蛋白水平,同时检测内质网应激及炎性小体相关蛋白,探索SphK2影响肾小管上皮细胞功能调控糖尿病肾病的分子机制。4、通过对小鼠原代肾小管上皮细胞及小鼠肾脏组织中的蛋白进行检测,进一步验证SphK2调控糖尿病肾病的分子作用机制。结果:与对照组相比,Leprdb/db小鼠肾脏中SphK2蛋白表达量显著增加,肾损伤和纤维化程度加重。而与Leprdb/db小鼠相比,Leprdb/db/SphK2-/-双基因敲除小鼠的肾损伤和纤维化程度显著改善,其表现为肾功能相关生化及病理学指标明显改善、KIM-1及FN蛋白表达显著下调。在高糖培养的NRK52E细胞中,SphK2 siRNA干扰抑制了高糖引起的KIM-1及FN的表达。此外,内质网应激相关ATF4/CHOP信号传感器、TXNIP、NLRP3炎性小体及其下游Caspase 1的激活均受到显著抑制。而在转染了SphK2质粒后,上述通路相关蛋白的表达均明显上调。SphK2-/-小鼠肾脏及原代肾小管上皮细胞的内质网应激和炎性小体激活效应均显著减轻,且IL-1β显著下调,肾脏损伤和纤维化情况减轻。结论:在肾小管上皮细胞中,SphK2通过调控内质网应激相关ATF4/CHOP信号传感器,诱导肾小管上皮细胞凋亡;同时激活TXNIP、NLRP3炎性小体及其下游Caspase 1的活化,促进成熟IL-1β的分泌,诱导炎症的发生。二者共同促进肾小管上皮细胞损伤和纤维化,最终加速糖尿病肾病的发展。