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冻绿,为鼠李科鼠李属植物,是我国著名的染料植物,其染色色素在植物印染历史方面享有很高的国际声誉,被称为“中国绿”。冻绿在长江流域各省广布,除作为纯天然绿色染料色素外,各地民间广泛用作抗炎草药,因此本课题组开展了冻绿果实种子油脂提取工艺、果实色素提取工艺及果实的急性毒性,以及冻绿根、枝、干皮和叶等部位的抗炎镇痛活性等研究。具体结果如下:(1)采用均匀设计法对冻绿种子油脂浸提工艺进行优化研究,得到冻绿种子油脂浸提的最佳条件是:料液比1:19(g:mL),浸提温度90℃,浸提时间2h。冻绿种子油脂得率的理论预测值是22.14%,平行试验验证的油脂得率(均值)为22.47%。运用GC-MS分析冻绿种子油脂,发现其含有亚油酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸、硬脂酸等21种脂肪酸。其中,油酸30.14%、亚油酸39.54%、亚麻酸21.53%,三者在油脂中合占91.21%。(2)冻绿果实最佳提取工艺条件为:以70%的酸化乙醇为提取剂,提取温度90℃,料液比1:12(g:mL),提取时间2.5 h。理化性质研究发现该色素具有一定的开发利用价值。(3)采用改良寇式法研究了冻绿果实(全果)对小鼠的急性毒性,结果表明:其LD50为3.90 g· kg-1,具有一定的急性毒性,不可食用。(4)小鼠热板法镇痛研究结果显示:冻绿叶正丁醇提取物的高、中、低剂量组均表现出极显著的抑制作用(P<0.01),冻绿叶正丁醇提取物的高剂量组的痛阈提高率达63.48%。(5)小鼠冰醋酸扭体法镇痛研究结果显示:冻绿叶正丁醇提取物的高、中、低剂量组同样表现出极显著抑制作用(P<0.01),高剂量组的扭体反应潜伏时间比模型组的延长了一倍以上,其扭体反应抑制率为62.16%。(6)二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀炎症试验结果表明:冻绿干皮及叶正丁醇提取物都表现出显著的抑制作用(P<0.01,P<0.05),但冻绿叶正丁醇提取物能更好的减轻二甲苯所致的小鼠耳廓炎症,其高、中、低剂量组的肿胀抑制率分别为62.16%、50.69%、41.06%。(7)冻绿叶正丁醇提取物硅胶柱洗脱流份的抗炎活性研究表明:氯仿:甲醇=1:9洗脱流分的抗炎效果最好,其高剂量组和低剂量组均对小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用(P<0.01),肿胀抑制率分别为63.47%和50.98%。(8)冻绿叶正丁醇提取物经硅胶柱层析的氯仿:甲醇=9:1流份和氯仿:甲醇=7:3流份,均具有黄酮类和皂苷类成分。冻绿叶正丁醇提取物经硅胶柱层析所得氯仿:甲醇=5:5流份、氯仿:甲醇=3:7流份和氯仿:甲醇=1:9流份,都不含有黄酮类和皂苷类成分。对具有较好抗炎效果的叶正丁醇提取物氯仿:甲醇=1:9洗脱流份,运用半制备HPLC分离,得到2个较纯的化合物。