耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药基因的研究

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[目的]   1.研究深圳市第二人民医院临床分离的铜绿假单胞菌对12种常用抗生素的药物敏感性,进而了解其耐药现状。   2.分析亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌的外膜蛋白oprD2基因,了解因外膜蛋白缺失导致亚胺培南耐药的耐药机制。   3.为临床合理选择抗生素及积极预防院内感染的发生提供依据,控制铜绿假单胞菌耐药率的上升。   [方法]   1.收集深圳市第二人民医院2011年7月至2011年12月临床分离的铜绿假单胞菌株122株。   2.应用K-B法检测122株临床分离铜绿假单胞菌对12种临床常用抗生素的敏感性。   3.采用菌体直接裂解法提取耐亚胺培南铜绿假单胞菌的DNA。   4.以菌株DNA为模板,PCR法扩增耐亚胺培南铜绿假单胞菌的外膜蛋白oprD2基因。   5.扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳并用凝胶成像系统观察、照像。   [结果]   1.亚胺培南的耐药率:临床分离的122株铜绿假单胞菌中,耐亚胺培南的菌株有45株,对亚胺培南敏感的有77株,耐药率为36.9%。   2.122株铜绿假单胞菌的科室分布:主要分布于康复医学科(15.6%),其次为神经外科(14.8%)、烧伤整形科(10.6%)、ICU(10.6%)、呼吸内科(9.0%)、神经内科(7.4%),其它科室相对较少。   3.铜绿假单胞菌对12种抗生素的耐药性:铜绿假单胞菌对氨曲南、美罗培南和阿米卡星耐药率较低(分别为14.7%、17.2%、18.0%),耐药率最高是左氧氟沙星(40.2%),其次是亚胺培南(36.9%)和庆大霉素(36.9%)。   4.耐亚胺培南铜绿假单胞菌株外膜蛋白OprD2的检测:45株耐亚胺培南铜绿假单胞菌株未扩增出OprD2的有19株,缺失率为42.2%。   [结论]   1.深圳市第二人民医院铜绿假单胞菌中耐亚胺培南的检出率较高,为36.9%。   2.铜绿假单胞菌对美罗培南、阿米卡星的敏感性最高,分别是82.8%和82.0%,其它抗生素均有不同程度耐药。   3.深圳市第二人民医院耐亚胺培南铜绿假单胞菌株中外膜蛋白OprD2的缺失率为42.2%。可能是本地区铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要机制之一。临床应根据药物敏感试验结果合理选择抗生素,减少耐药株的出现。
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