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朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)属于蛛形纲,蜱螨亚纲,真螨目,叶螨科,是一种世界性害螨。该螨能够为害茄子、番茄、辣椒、马铃薯、黄瓜、豆类等多种蔬菜瓜果,也能为害棉花、花卉等经济作物,其防治具有十分重要的经济意义。目前,朱砂叶螨的防治仍以化学防治为主,但杀虫杀螨剂的长期施用在导致朱砂叶螨出现严重抗性问题的同时,还诱发了害虫再猖獗现象。抗性监测表明朱砂叶螨已经对菊酯类药剂产生严重抗药性,同时,诸多研究表明菊酯类药剂在田间降解至亚致死剂量时,对靶标生物有毒物兴奋效应,即对靶标生物的生殖力有积极的刺激作用,反而能够导致靶标生物种群数量的扩大。本实验室通过长期的抗性筛选获得了朱砂叶螨甲氰菊酯抗性品系(Fe R),在饲养过程中发现其种群发展速度明显快于同源敏感品系(SS)。本研究以此为切入点,重点研究Fe R相对SS增强的生殖力背后的机制,为明确有害生物再猖獗的原因提供参考。卵黄原蛋白(Vitellogenin,vg)与卵黄原蛋白受体(Vitellogenin receptor,vgr)是卵生动物在卵黄发生过程中发挥重要功能的两种蛋白,它们对卵母细胞和卵巢的发育成熟具有十分重要的意义。理论上,朱砂叶螨vg及vgr蛋白对朱砂叶螨产卵量等生殖参数发挥着决定性的影响作用。针对朱砂叶螨Fe R与SS品系之间的产卵能力存在显著差异的现象,本研究从vg与vgr的角度开展了相关研究,主要研究内容和结果如下:1.Fe R日均产卵量在进入成螨期第四天达到顶峰,日均产卵13.00粒;SS日均产卵量在进入成螨期第五天达到顶峰,日均产卵9.64粒;Fe R日均产卵量始终高于SS。Fe R产卵量为173.25粒,SS产卵量为100.92粒。两品系的产卵量之间存在显著性差异,Fe R整个生命周期的产卵总量显著高于SS。2.通过检测朱砂叶螨不同品系vg和vgr在成螨期的含量差异发现,Fe R中vg及vgr两种蛋白的含量分别显著高于SS中相应蛋白的含量。vg在Fe R和SS中含量分别为0.1617±0.0146μg/mg和0.0904±0.0038μg/mg;vgr在Fe R和SS中含量分别为0.0455±0.0035μg/mg和0.0231±0.0085μg/mg。3.克隆拼接获得两条朱砂叶螨vg基因和一条vgr基因,分别命名为Tcvg1,Tcvg2与Tcvgr。Tcvg1全长5268bp,编码1755个氨基酸,Gen Bank登录号为KR090058;Tcvg2全长5253bp,编码1750个氨基酸,Gen Bank登录号为KR090059;Tcvgr全长5559bp,编码1852个氨基酸。Gen Bank登录号为KT180304。Tcvg1,Tcvg2均含有卵黄原蛋白特征保守域Vitellogenin_N,DUF1943,VWD;Tcvgr含有特征保守域LDLa、EGF_CA、LY domain以及NHL重复子。4.SS与Fe R的Tcvg1,Tcvg2与Tcvgr三条基因在实验设计的检测发育阶段内的表达趋势大致一致:发育为成螨前三条基因表达量均很低,在3日龄雌成螨时三条基因表达量猛增到峰值,随后在10日龄雌成螨体内表达量下降。在产卵前期(0A)和3日龄雌成螨(3A)两个时间点检测并比较SS与Fe R两品系间三条基因的m RNA表达量,结果表明Fe R品系的Tcvg1,Tcvg2和Tcvgr表达量均显著高于SS。本论文研究结果表明,长期药剂胁迫形成的朱砂叶螨甲氰菊酯抗药性品系,卵黄原蛋白和卵黄原蛋白受体基因上调表达,其体内卵黄原蛋白和卵黄原蛋白受体含量相应显著上升,导致其生殖力显著提高。该机制可能是导致有害生物再猖獗的原因之一。