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穗花马先蒿(Pedicularis spicata),属玄参科马先蒿属植物,主要分布于我国西北和西南地区。近年来,有关穗花马先蒿的主要化学成分及其药理学研究已有报道,但关于穗花马先蒿杀虫活性方面的研究尚未见报道。本文作者通过对宁夏36种植物的筛选,发现穗花马先蒿具有较好的杀虫活性。本论文以杀虫活性为切入点,首先对穗花马先蒿粗提物的杀虫活性及活性作用方式进行了研究,并对不同部位杀虫活性进行了比较;在此基础上,采用化学分离和生物活性跟踪检测相结合的方法,对穗花马先蒿的活性成分进行了筛选,并结合GC/MS对主要成分进行初步鉴定。主要研究结果如下:
1穗花马先蒿对不同试虫的杀虫活性研究
分别测试了穗花马先蒿乙醇提取物对小菜蛾、粘虫、枸杞蚜虫和白菜蚜虫的杀虫活性,结果表明对小菜蛾的杀虫活性最高,后续试验以小菜蛾为靶标试虫。
2穗花马先蒿乙醇提取物对小菜蛾作用方式研究
测试了穗花马先蒿乙醇提取物对小菜蛾3龄幼虫的触杀、拒食和抑制生长发育活性,发现其对小菜蛾3龄幼虫具有较高的的触杀和拒食活性。浸渍法处理对小菜蛾3龄幼虫72 h的致死中浓度(LC50)为4.663 g·L-1,24h和48h的拒食中浓度(AFC50)分别为8.238 g·L-1、9.185 g·L-1。
3穗花马先蒿不同部位的杀虫活性比较
以小菜蛾为靶标试虫,对穗花马先蒿不同部位提取物的杀虫活性进行了比较,结果表明:不同部位对小菜蛾的杀虫活性从大到小依次为叶>花+花序>根>茎。
4穗花马先蒿活性成分的筛选
采用化学分离和活性追踪相结合的方法对穗花马先蒿中的活性成分进行逐级筛选。首先选用五种不同极性的溶剂按照极性由小到大的顺序对粗提物进行梯度萃取,测定不同极性萃取物的杀虫活性,选择活性较高部分(石油醚和氯仿萃取层)进行柱层析分离。经过连续三级柱层析分离,得到活性较高部分,经GC/MS分析鉴定,初步推测主要成分可能是邻苯二甲酸酯类、脂肪酸类和脂肪酸酯类化合物。