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目的:分析精子DFI值与精液常规各参数的关系,以及与妊娠结局的相关性,阐明精子DFI作为男性生育评估独立生物标志物在临床上的应用价值,证实精子DFI在人类辅助生殖技术中的指导作用。方法:1、研究对象的病例资料收集:在我院生殖中心的辅助生殖技术管理系统中,限定时间在2018年1月至2020年12月范围,导出原始数据。病例信息选择男性和女性配偶年龄、诊断、精子DFI、精液各参数、辅助生殖技术以及受精、卵裂、D3可用胚胎数、妊娠情况和活产数等。2、研究对象分组:根据DFI结果分为六组（DFI＜10%组、10-20%组、21-31%组、31-40%组、41-50%组和≥50%组）。根据男性年龄,分为三组:20-31岁（不包含31岁）、31-40岁（包含31岁和40岁）和40岁以上。根据临床指征分为原发性不育组和继发性不育组。根据女性年龄,分为两组,分别为20-30岁组和31-40岁组（包含31岁年龄的病例）。3、统计方法:对于连续变量,采用Shapiro-Wilk检验进行正态性检验。如果独立样本的连续数据符合正态分布,则以平均值±标准差表示,如果数据不符合正态分布,则采用中位数[四分位间距]表示。计数数据以计数（%）表示。对于独立样本的连续数据,若分布符合正态分布,多组间比较采用单因素方差分析（One way ANOVA）;若分布不符合正态分布,多组间比较采用Kruskal-Wallis H秩和检验。使用Bonferroni方法对多个组别进行P值校正。若分布符合正态分布则采用Pearson相关性分析,否则采用Spearman对精子DFI与年龄、精液量、浓度、畸形、精子运动参数的进行相关性分析。采用限制性立法样条函数（RCS）不同辅助生殖技术的受精率、卵裂率、D3可用胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率及活产率之间的相关性。研究均采用双侧检验,P＜0.05被认为具有统计学意义。结果:1、收集了具有年龄和精子DFI完整信息的病例共3971例,年龄中位数为33.4岁,精子DFI的中位数为14.3%。在进行不同类型分析时从中筛选出满足条件病例,其中可用于精子DFI与精液各参数的关系分析者共3957例,用于男性不同年龄组DFI及精液参数的比较分析者3787例,用于不同临床指征DFI及精液参数之间关系分析者共3779例,用于精子DFI与IVF结局的关系分析者1804例,用于精子DFI与ICSI结局的关系分析者394例,精子DFI＞30%不同女配偶年龄的IVF或ICSI受精和妊娠结局之间关系分析者分别为1804例和150例,用于IVF和ICSI结局在不同精子DFI的比较分析者2198例。2、将DFI值从低到高分成六个组,结果发现随着年龄的增长精子DFI逐渐增高（P=0.000,r=0.184）,而多数精液参数（精子浓度、前向运动精子、慢速或呆滞前向运动精子、非前向运动精子、精子畸形率）与精子DFI总体比较具有统计学差异（P＜0.05,r＜0.0）,但多个DFI亚组之间却无统计学差异,具体见表1。精子体积无相关性（P=0.933,r=0）。3、将男性不育患者分成3个年龄组,结果显示BMI、非前向运动精子、慢速或呆滞前向运动精子、精子畸形率和精子浓度在各年龄组之间无统计学差异（P＞0.05）;DFI、精液体积在各年龄组具有统计学差异（P＜0.05）;PR在31-40岁组和大于40岁组之间有统计学差异（P＜0.05）,而在20-31岁组之间无统计学差异（P＞0.05）。4、精子DFI、精液浓度、前向运动精子、慢速或呆滞前向运动精子和非前向运动精子在原发性不育和继发性不育两组中均具有统计学差异（P＜0.01）,而精子体积和精子畸形率在两组中无统计学差异（P＞0.05）。5、在IVF中,受精率在DFI各组之间总体比较具有统计学差异（P=0.00）,但仅体现在DFI＜10%组中。卵裂率、D3可利用胚胎率和囊胚形成率均无显著性差异（p＞0.05）。可移植胚胎率在各DFI组之间总体比较具有显著性差异（P=0.00）,但仅体现在DFI10-20%组。临床妊娠率在各组之间总体比较具有统计学差异（P=0.010）,但仅体现在DFI≥50%组中。未妊娠率、HCG阳性率和活产率,各组之间无统计学差异（P＞0.05）。RCS分析显示随着精子DFI值增高IVF受精率呈逐渐降低的趋势,而可移植胚胎率、HCG阳性率率、临床妊娠率和活产率呈逐渐降低的趋势。6、在ICSI中,受精率在各DFI组之间总体比较具有统计学差异（P＜0.001）,但仅体现在DFI＜10%和DFI31-40%组的病例中,卵裂率在各DFI组之间总体比较具有统计学差异（P＜0.001）,但仅体现在DFI＜10%和DFI31-40%组中,D3可利用胚胎率和囊胚形成率在DFI各组中无统计学差异（P＞0.05）,胚胎移植率在DFI各组中总体比较无统计学差异（P=0.116）,但仅体现在精子DFI10-40%范围的病例中。未妊娠率与DFI各组之间总体比较具有统计学差异（P=0.037）,但仅存在于DFI31-40%组和≥50%组中,HCG阳性率在精子DFI各组中总体比较无统计学差异（P=0.571）,但DFI21-40%范围具有统计学差异（p＜0.05）,临床妊娠率在精子DFI各组中总体比较具有统计学差异（P=0.033）,活产率在精子DFI各组中总体比较无统计学差异（P=0.092）。而RCS分析显示随着精子DFI值增高采用ICSI的受精率和卵裂率呈逐渐降低的趋势,而胚胎移植率、HCG阳性率、临床妊娠率和活产率均呈现增高趋势。7、在精子DFI＞30%时女性配偶年龄对IVF或ICSI结局影响的研究中发现,IVF受精率和卵裂率在各年龄组间无统计学差异（P＞0.05）,而D3可利用胚胎率具有统计学差异（P＜0.05）,妊娠结局的的四项参数（未妊娠率、HCG阳性率、临床妊娠率和活产率）均无统计学差异（P＞0.05）。与高龄组相比,采用ICSI的低龄组受精率、卵裂率和D3可利用胚胎率显著增高（P＜0.05）,妊娠结局的四项参数均无统计学差异（P＞0.05）。8、IVF和ICSI在不同精子DFI值中比较分析显示:与IVF相比,采用ICSI技术的总体受精率增高而卵裂率降低,D3可利用胚胎率增高而总体囊胚形成率降低。与IVF相比,采用ICSI技术的胚胎移植率在DFI各组之间均显著增高（仅在41-50%组无统计学差异）,未妊娠率在精子DFI≥50%组显著降低（P=0.002）,在精子DFI≥50%时采用ICSI比采用IVF的临床妊娠率和活产率增高,并具有显著性差异（P=0.002和P=0.013）。结论:1、精子DFI与年龄呈正相关而与常规精液参数的相关性不大,精子DFI可作为独立于精液常规参数之外的生物标志物用于评估精子染色质的完整性和男性生育力,并可提供受精能力的额外信息。2、精子DFI在原发性不育患者当中显著高于继发性不育患者。在精子DFI＞30%时可能已超出精子自我修复能力和卵母细胞对精子的修复能力,将会影响IVF的结局,因此当精子DFI＞30%尤其DFI≥50%时采用ICSI比采用IVF的临床妊娠率和活产率显著增高。3、在IVF中,精子DFI＜10%受精率存在显著性差异但不影响卵裂率。在DFI≥50%时临床妊娠率将显著降低。随着精子DFI值增高IVF受精率呈逐渐降低的趋势,而可移植胚胎率、HCG阳性率、临床妊娠率和活产率呈逐渐降低的趋势。4、在ICSI中,随着精子DFI值增高采用ICSI的受精率和卵裂率呈逐渐降低的趋势,而胚胎移植率、HCG阳性率、临床妊娠率和活产率均呈现增高趋势。