高压氧对SAH大鼠模型早期脑白质损伤的作用研究

来源 :川北医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songhongyu8211
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目的:通过建立蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠模型,并给予高压氧治疗(hyperbaric oxygen,HBO),观察HBO对SAH后早期白质损伤(white matter injury,WMI)及神经功能恢复的作用,为HBO治疗SAH后WMI提供实验依据。方法:将70只Sprague-Dawley雌性大鼠(SD雌性大鼠)随机分为空白对照组(n=10只)、假手术后24h组(n=10只)、假手术后72h组(n=10 只)、SAH 模型 24h 组(n=10 只)、SAH 模型 72h 组(n=10只)、SAH+HBO 24h 组(n=10 只)、SAH+HBO 72h 组,共 7 组。空白对照组不做任何处理,假手术组只在颅骨进行钻孔,后4组采用交叉前池注血法制备成大鼠SAH模型,其中SAH+HBO组高压氧治疗时间开始于建模成功后4-6h,每日2次。于相应时间点(24h或72h)后,对大鼠进行mNSS神经功能评分,处死大鼠取其临近视交叉前池积血处的两侧脑白质,用特殊银染色观察轴突、髓鞘损伤情况、TUNEL染色检测胶质细胞凋亡情况、免疫组织化学和Western blotting检测脑组织中轴突损伤标记物(β-APP和NG2)和髓鞘蛋白标记物(MBP)的表达。采用IBM SPSS Statistics 23.0统计软件对数据进行分析。结果:1.SAH组大鼠各时间点mNSS评分较假手术组高,差异性有统计学意义(P<0.05);SAH+HBO组各时间点mNSS评分较SAH组低,差异有统计学意义(P0.05)。2.显微镜下观察脑组织特殊银染色示正常对照组和假手术组神经元轴突及神经纤维呈细长黑色条状;SAH组有轴突断裂、神经纤维聚集缠绕等轴突损伤现象;SAH+HBO组也存在轴突损伤,但程度较SAH组轻。3.TUNEL染色SAH组大鼠各时间点细胞凋亡数量较假手术组高,差异性有统计学意义(P<0.05);SAH+HBO组各时间点细胞凋亡数较SAH组低,差异有统计学意义(P0.05)。4.SAH 组大鼠各时间点β-APP和NG2阳性率较假手术组高,MBP较假手术组低,差异性有统计学意义(P<0.05);SAH+HBO组β-APP、NG2阳性率较SAH组低,MBP阳性率较SAH组高,差异性有统计学意义(P0.05)。5.Western blotting提示NG2、β-APP及MBP表达趋势与免疫组化变化一致,差异有统计学意义(P0.05)。结论:HBO能减轻大鼠SAH后早期WMI,改善SAH大鼠神经功能障碍。
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