目的研究HSC中TGF-β1通过smad3对IL-1R1及IL-1β的影响。方法构建转化生长因子TGF-β1的短发卡RNA(shRNA)及阴性对照质粒组装入慢病毒载体,分别转染至大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞,筛选出稳定干扰细胞株,并分别命名为TGF-β1-KD组和Ctrl-KD组。用细胞因子TGF-β1 12ng/ml刺激HSC细胞和TGF-β1-KD细胞,即实验分为五组:A:HSC组、B:HSC+TGF-β1组、C:Ctrl-KD组、D:TGF-β1-KD组、E:TGF-β1-KD+TGF-β1组。细胞培养48h后,提取各组总RNA、总蛋白采用q-PCR、Western-blot检测IL-1R1、IL-1β、α-SMA的表达情况。为了探讨smad3在其中的作用,在B组的基础上使用smad3抑制剂(SIS3)提前2h处理HSC,采用Western-blot检测IL-1R1和IL-1β的变化。为了进一步探讨IL-1β对HSC的活化是否依赖TGF-β1,我们用12ng/ml的TGF-β1和IL-1β细胞因子分别处理A组和D组细胞,采用Western-blot检测α-SMA和Col-Ⅰ的表达。结果TGF-β1 shRNA慢病毒感染HSC之后,IL-1R1、IL-1β的蛋白水平上调36.7%、34.9%(P值分别为0.0087,0.0029),α-SMA的蛋白水平下调22.3%(P=0.0117),IL-1R1的mRNA相对水平明显上调106.6%(P=0.0027)。而在TGF-β1细胞因子刺激HSC之后呈现相反的趋势,IL-1R1、IL-1β的蛋白水平下调83.0%、28.5%(P<0.001,P=0.0014),α-SMA的蛋白水平上调49.5%(P=0.0049),IL-1R1的mRNA相对水平明显下调45.7%(P=0.0011)。抑制剂SIS3提前处理后,TGF-β1对IL-1R1和IL-1β的抑制作用较TGF-β1单独刺激时较弱(P=0.003)。细胞因子TGF-β1和IL-1β刺激HSC后,α-SMA和Col-Ⅰ的表达量均增加(P<0.05),刺激TGF-β1-KD细胞后表现出相同的上调效果。结论在大鼠肝星状细胞中TGF-β1可通过smad3抑制IL-1R1的表达,也可直接抑制IL-1β的表达。