目的:研究三叶苷(TLB)延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用,并探究其可能的作用机制。方法:同期化的秀丽隐杆线虫株均在新鲜的NGM板上20°C培养2-3代后用于实验。在正常培养条件下观察不同浓度TLB(62.5、125、250μM)对秀丽隐杆线虫寿命的影响,并筛选出TLB的最佳延寿浓度。由于250μM TLB的延寿效果最佳,因此在后续实验中采用该浓度进行实验。将实验秀丽隐杆线虫随机分为对照组及250μM TLB组,通过检测秀丽隐杆线虫生殖力、移动力、脂褐质及咽泵速率等评价TLB对正常寿命相关生理指标的影响。在此基础上,将对照组和250μM TLB组秀丽隐杆线虫于20°C条件下培养72 h,然后在35°C条件下孵育2 h进行热应激实验,或将秀丽隐杆线虫转移到含百草枯的NGM板上,在20°C条件下孵育进行氧化应激实验。通过ELISA法检测秀丽隐杆线虫体内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、SOD及其亚型(SOD1、SOD2和SOD3)、过氧化物酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平。采用荧光显微镜检测CF1139(DAF16::GFP)、CL2166(GST4::GFP)、KN259(SOD3::GFP)、LD1008(SKN1::GFP)和TJ375(HSP16.2::GFP)荧光强度。通过daf16,sir2.3,skn1,sod3,sod2和gst4缺失的突变秀丽隐杆线虫株观察TLB对秀丽隐杆线虫寿命的影响。结果:研究结果表明在自然寿命实验中,TLB明显延长野生型秀丽隐杆线虫的寿命;TLB明显增加秀丽隐杆线虫的移动能力,减少咽泵率及其脂褐质含量,但其对秀丽隐杆线虫的生殖力无影响;TLB具有明显抗热应激和氧化应激的作用;TLB能够降低秀丽隐杆线虫ROS和MDA含量,增加SOD2,SOD3和CAT活力,但并未影响SOD1、GSH和GSH-Px活力。TLB还可明显增加长寿蛋白DAF16::GFP、SKN1::GFP、SOD3::GFP、HSP16.2::GFP、GST4::GFP的水平。而TLB对daf16、sir2.3、skn1、sod3、sod2和gst4缺失的突变秀丽隐杆线虫株的寿命无影响。结论:在本实验条件下,TLB可明显延缓秀丽隐杆线虫的衰老,其机制与调控SKN1/SIRT3/DAF16信号途径进而提高秀丽隐杆线虫抗氧化能力有关。