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目的 骨缺损的再生主要依靠骨自身的修复能力。骨组织虽然具有强大的再生能力,但因各种原因导致的大面积骨缺损仍是临床中比较棘手的问题。在组织工程中,生长因子是诱导成骨能力的重要媒介。骨组织工程利用生长因子诱导细胞成骨,并联合支架材料用于骨缺损,已经被临床和科研广泛采用。目前在组织工程中应用较为广泛的生长因子主要有骨形态发生蛋白、血管内皮生长因子、转化生长因子等。但它们都存在着相应的缺点和弊端,难以完美满足骨组织过工程发展的需要。而我们通过文献研究发现目前有多项研究报道SHP-2基因可以有效地促进破骨细胞分化,并参与成骨分化细胞通路,且该基因敲除的小鼠出现了骨发育迟缓障碍,因此我们预测该基因可以促进成骨细胞分化和骨生成,并通过实验证实这一假设方法 使用PCR方法扩增SHP-2基因,构建SHP-2基因慢病毒表达载体,并转染大鼠骨髓间充质干细胞。根据细胞状态设计4个实验组,分别为:单纯BMSCs组,经成骨细胞诱导液诱导的BMSCs组,经SHP-2基因修饰的BMSCs组和成骨细胞诱导液联合SHP-2基因修饰的BMSCs组,四组细胞进行体外培养,并在不同的培养阶段利用PCR、Western检测定各组成骨标志物的表达,碱性磷酸酶和茜素红染色检测成骨活性。制作大鼠颅骨缺损模型,将4组细胞/磷酸三钙复合物植入到颅骨缺损处,取材后将组织进行放射学检查、HE、Masson染色和免疫组织化学染色鉴定骨修复的效果。结果 SHP-2慢病毒表达载体转染大鼠骨髓间充质干细胞后持续有效的增加了SHP-2在细胞内的表达。体外实验中,SHP-2基因转染BMSCs组和成骨细胞诱导液联合SHP-2基因修饰的BMSCs组成骨标志物较其他组表达为高。在体内实验中,植入后8周大体组织学和影像学检查表明,SHP-2基因转染组和SHP-2基因转染联合成骨细胞诱导液诱导组在成骨标志物表达和促进骨组织生成方面多于其他组。结论 SHP-2高表达可促进大鼠骨髓间质干细胞在体外向成骨细胞分化。SHP-2基因转染大鼠骨髓干细胞联合β-TCP支架可以有效地的修复大鼠骨缺损模型。