目的:基于代谢组学的研究方法,观察四君子汤对16月龄雄、雌小鼠血浆、脾组织、肾组织中代谢物质以及代谢通路富集情况的影响,解析四君子汤对增龄小鼠的内源性物质变化的影响,为揭示四君子汤干预衰老相关病证的生物学基础提供科学依据。方法:采用自然衰老模型,正常饲养ICR小鼠到3月龄与16月龄。选取3月龄小鼠为空白组(3M组),将16月龄自然增龄小鼠随机分为模型组(16M组)、给药组(SJZ组),每组20只(雄鼠10只,雌鼠10只)。给药组小鼠予以四君子汤药液灌胃(给药剂量为9.75g/kg·d,给药体积为13ml/kg·d);空白组、模型组小鼠予以等容生理盐水灌胃。连续灌胃30天后,制备血浆、脾、肾组织样本,并采用UPLC-Q-TOF-MS技术进行代谢组学分析。结果:1.经四君子汤干预后,小鼠血液、脾组织及肾组织中代谢物的代谢轮廓发生明显变化,将这三种样本进行PCA分析处理,显示空白组(3M)、模型组(16M)、给药组(SJZ组)数据组间区分良好,给药组代谢物的表达情况向空白组回调。2.四君子汤对血浆、脾组织和肾组织样品中增龄相关标志性差异物的调节概况:1)血浆样品中模型组(16M)与空白组(3M)相比,筛选出与增龄相关的生物标记物,其中雄性小鼠中有32个,雌性小鼠中有36个,鉴定出的生物标记物与7条代谢途径相关,其中雄、雌小鼠体内标志性代谢物分别富集在4条代谢通路中;四君子汤组可回调雄性小鼠中19个代谢物,雌性小鼠16个代谢物,回调的代谢物与8条代谢途径相关,其中雄、雌小鼠体内标志性代谢物分别富集在4条代谢通路中。2)将脾组织样品中模型组(16M)与空白组(3M)相比,筛选鉴定出与增龄相关的生物标记物,雄性小鼠中有59个,雌性小鼠中有69个,鉴定出的生物标记物与21条代谢途径相关,其中雄、雌鼠体内标志性代谢物分别富集在17条和7条代谢途径中,有3条通路为雄雌小鼠共同代谢途径;四君子汤组可回调雄性小鼠中53个代谢物,雌性小鼠19个代谢物,回调的代谢物与19条代谢途径相关,其中雄、雌鼠体内标志性代谢物分别富集在16条和3条代谢途径中。3)肾组织样品中模型组(16M)与空白组(3M)相比,筛选鉴定出与增龄相关的生物标记物雄性小鼠中有70个,雌性小鼠中有67个,鉴定出的生物标记物与25条代谢途径相关,其中雄、雌鼠体内标志性代谢物分别富集在20条和17条代谢途径中,有12条通路为雄雌小鼠共同代谢途径;四君子汤组可回调雄性小鼠中54个代谢物,雌性小鼠39个代谢物,回调的代谢物与27条代谢途径相关,其中雄、雌鼠体内标志性代谢物分别富集在17条和10条代谢途径中。3.四君子汤对16月龄小鼠不同性别中增龄相关标志性差异物的调节情况:1)在雄鼠体内,四君子汤通过调节二十二碳六烯酸,左旋肉碱的代谢影响血浆、脾组织和肾组织的代谢;血浆和肾组织样本中,被影响的相同代谢物质有5个;肾组织和脾组织样本中,被影响的相同代谢物质有10个;血浆和脾组织样本中,被影响的相同代谢物质有4个。2)在雌鼠体内,四君子汤可以通过调节13S-羟基十八碳二烯酸的代谢影响血浆、脾组织和肾组织的代谢;血浆和肾组织样本中代谢物参与的代谢中,被影响的共同物质有4个;血浆和脾组织样本中,被影响的相同代谢物有3个;肾组织和脾组织样本中,被影响的相同代谢物有7个。4.四君子汤对16月龄小鼠不同样本中增龄相关标志性差异物的调节情况:1)在血浆样品中,四君子汤通过调节雌酮、二十二碳六烯酸、L-二氢乳清酸等4个物质来干预雄、雌小鼠的生理状态;2)在脾组织样品中,四君子汤通过调节16-a-羟基孕烯醇酮、磺酰胆碱甘氨酸、L-谷氨酸等9个物质来干预雄、雌小鼠的生理状态;3)在肾组织样品中,四君子汤通过调节L-苯丙氨酸、L-色氨酸、FAD、黄素单核苷酸、肌酸等19个物质来干预雄、雌小鼠的生理状态。结论:1.模型组(16M)小鼠与空白组(3M组)小鼠相比,血浆、脾组织、肾组织样本中代谢标志物均发生不同程度的变化,说明小鼠在自然生长发育状态下整体代谢水平有明显改变,这些代谢物标志物主要集中在氨基酸代谢和脂类代谢相关途径中。2.四君子汤对16月龄小鼠血浆、脾组织、肾组织样本中筛选出的增龄相关代谢物均有一定的回调作用,回调物质分别参与了血浆、脾组织、肾组织样本中8、19、27条衰老相关代谢途径,主要集中于氨基酸代谢和脂类代谢相关途径。3.四君子汤主要调节的代谢通路与小鼠增龄变化影响的通路类别相近,说明四君子汤能调节增龄引起的各组织整体代谢的改变。4.四君子汤对16月龄小鼠不同性别、不同组织样本中增龄相关标志性差异物具有调节作用。