PSC和炎性细胞及PDGF-B、TGF-β1、CTGFmRNA在CP发生发展过程中的作用及相关性研究

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背景:慢性胰腺炎(CP)是世界范围内的常见难治性慢性疾病,对其确切发病机制尚不十分清楚,目前尚无特异的诊断方法和有效的治疗措施。研究发现,CP可通过胰腺上皮内瘤变(PanIN)这一阶段导致胰腺癌(PC)的发生。自1997年发现并分离培养出胰腺星形细胞(PSC)以来,大量的研究发现PSC的活化是胰腺纤维化发生的核心环节。因此,对PSC活化机制及调节因素的研究尤显重要。目的:探讨人类CP发生发展过程中PSC活化、浸润的炎性细胞及PDGF-B、TGF-β1、CTGFmRNA表达的关系及相关性。方法:收集53例人类CP和7例正常胰腺组织标本。HE染色后行形态学观察和病理学评分;VG苦味酸酸性品红染色胶原纤维;甲苯胺蓝染色肥大细胞;SP免疫组化法染巨噬细胞和a-SMA;PDGF-B mRNA、TGF-β1 mRNA及C7GF mRNA染色为原位杂交法。高倍镜下计数5个视野,取均值为该切片肥大细胞、巨噬细胞及PSC计数值;表达面积和灰度值测定均为每张切片取5个视野,采用医学图文分析进行定量测定,取均值为该切片测定值。结果:(1)纤维化程度:各CP组纤维化面积高于正常组(P<0.01或P<0.05),中度和重度CP组高于轻度CP组(P<0.01或P<0.05),重度CP组高于中度CP组(P<0.05)。(2)a-SMA表达:各CP组a-SMA计数高于正常组(P<0.01或P<0.05),重度组显著高于轻度和中度组(P<0.01);各CP组a-SMA灰度值显著高于正常组(P<0.01)。(3)肥大细胞和巨噬细胞计数:各CP组肥大细胞计数明显高于正常组(P<0.01),中度和重度CP组肥大细胞计数高于轻度CP组(P<0.05);巨噬细胞计数各组之间无明显差异(P>0.05)。(4)PDGF-B mRNA表达:中度和重度CP组表达面积均高于正常组(P<0.01或P<0.05),重度CP组表达面积显著高于轻度和中度组(P<0.01);各CP组灰度值均明显高于正常组(P<0.01);各CP组评分均明显高于正常组(P<0.01),重度CP组评分高于轻度和中度CP组(P<0.05或P<0.01)。(5)TGF-β1 mRNA表达:中度和重度CP组表达面积均高于正常组(P<0.01或P<0.05),重度CP组表达面积显著高于轻度和中度组(P<0.01);各CP组灰度值均显著高于正常组(P<0.01);各CP组评分均高于正常组(P<0.01或P<0.05),重度CP组评分高于轻度和中度CP组(P<0.05或P<0.01)。(6)CTGF mRNA表达:各CP组表达面积均高于正常组(P<0.01或P<0.05),重度CP组表达面积显著高于轻度CP组(P<0.01);各CP组灰度值均显著高于正常组(P<0.01);各CP组评分均显著高于正常组(P<0.01),重度CP组评分高于轻度CP组评分(P<0.05)。(7)相关性分析:病变程度、纤维化面积、a-SMA计数、肥大细胞计数、PDGF-B mRNA、TGF-β1 mRNA、CTGF mRNA表达面积和评分之间均呈高度密切正相关(P<0.01);a-SMA灰度值与纤维化面积、巨噬细胞计数、PDGF-B mRNA、TGF-β1 mRNA、CTGF mRNA灰度值呈密切或高度密切正相关(P<0.01或P<0.05);PDGF-BmRNA灰度值与病变程度、纤维化面积、肥大细胞计数、巨噬细胞计数和CTGF mRNA灰度值呈密切或高度密切正相关(P<0.01或P<0.05);TGF-β1 mRNA灰度值与病变程度和CTGF mRNA灰度值之间均呈密切正相关(P<0.01);CTGF mRNA灰度值与病变程度、纤维化面积均呈高度密切正相关(P<0.01);PDGF-B mRNA、TGF-g1mRNA和CTGF mRNA表达面积及评分之间均呈高度密切正相关(P<0.01)。结论:胰腺纤维化是CP病变过程中最重要和最具意义的一种形态学改变,PSC的活化是纤维化发生的核心环节;CP病变程度与浸润在胰腺组织中的肥大细胞和巨噬细胞有关;PDGF-B mRNA、TGF-β1 mRNA和CTGF mRNA的表达水平影响CP病变程度、纤维化程度和PSC活化程度,这些细胞因子之间存在密切相互关系,它们都是PSC的主要激活因子。
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