核酸适配体应用于双酚A快速检测新方法研究

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大量研究发现双酚A是一种环境内分泌干扰物,对人体具有致癌、致畸和致突变等危害,会影响婴幼儿的正常成长发育。传统的双酚A检测方法具有灵敏度高、精确度好、重复性好等优点,但同时还具有检测费用高、需要精密仪器、无法满足快速实时检测的缺点。因此,亟需开发一种简便、快速灵敏的双酚A检测方法。核酸适配体能与靶标进行也异性结合,在检测中具有其独特的优越性,因而本研究以核酸适配体为基础,开发出三种不同的比色法快速实时检测环境中双酚A的方法:(1)开发了一种利用纳米颗粒催化TMB/H2O2法检测双酚A的技术。纳米金颗粒具有一定的催化活性,可以催化TMB/H2O2显淡蓝色;而核酸适配体包裹的AuNPs颗粒的催化活性增强,催化TMB/H2O2显深蓝色。在最优检测条件下,对双酚A的检测线性范围为6.79~1500 nM,最低检测限为6.79 nM。(2)开发了一种基于双酚A特异性核酸适配体的表面活性剂CTAB聚集纳米金比色法检测双酚A的技术。该方法中CTAB具有两方面的作用:一是可以与适配体发生反应形成超分子结构的复合物;其次是CTAB能破坏纳米金表面的静电平衡使得其发生聚集,从而导致溶液的颜色发生由酒红到蓝色的变化。在最优检测条件下,该反应体系对双酚A的检测限为3.2 nM,线性范围为0.032μM~2.0 μM,对河水中双酚A的加标回收率为100.1%~108.5%。(3)开发了一种基于双酚A特异性核酸适配体的阳离子聚合物PDDA聚集纳米金比色法检测双酚A的技术。本技术的关键是PDDA既能与适配体通过静电力结合形成类似“双链”结构,同时又具有破坏纳米金颗粒之间的静电平衡使其发生聚集的功能。该检测方法具有良好的特异性,检测线性范围为1.50~500 nM,对双酚A的检测下限为1.50 nM,对自来水和河水的加标回收率范围为100.94~112.71%,相对标准偏差为6.72~13.08%。
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