鲜姜黄中姜黄素的提取分离及纯化工艺研究

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姜黄(Curcuma longa L.)是一种药食两用植物。近年来,因其独特的药理活性,而成为研究的热点,但对鲜姜黄的研究报道尚不多见。本文以鲜姜黄为研究对象,开展了姜黄素的匀浆法提取,获得了姜黄素与姜黄油的联合提取工艺,优化了姜黄素的高效液相(HPLC)测定方法,并对其进行了分离纯化工艺研究,同时对鲜姜黄和干姜黄中姜黄油的主要成分进行了鉴定。1.对比了干姜黄与鲜姜黄中姜黄油的主要成分。测定出两种原料中姜黄油含量,分别为5.01%、1.49%。经气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析发现,两者主要成分为α-姜烯、α-姜黄烯、姜黄酮、芳姜黄酮等。2.以匀浆后的姜黄残渣为原料,对比了索氏法和超声法提取姜黄油的效果。两者得率分别为4.59%、3.42%。GC-MS分析发现,索氏法分离出色谱峰较多,并包含超声法分离出的所有色谱峰,所得姜黄油主要组分大致相同,含量最高的均为芳姜黄酮。从提取时间、温度及产品外观综合考虑,超声法效果较佳。3.优化了姜黄素的HPLC检测条件。采用Agilent TC-C18(5μm,250mm×4.6mm)色谱柱;在检测波长为425nm,柱温为30℃;流动相组分A.乙腈、B.0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(用酸调整PH至2.5);流速为1.0mL/min;在0-20min内B相从55%增加到60%;第20~30min内B相从60%降低到55%内梯度洗脱,能够实现姜黄素的基线分离。4.采用匀浆法提取鲜姜黄中姜黄素的优化工艺条件。提取溶剂为75%乙醇溶液,匀浆时间3min,匀浆转数12000r/min,料液比1:7(g/m L)。此工艺条件下匀浆法姜黄素的得率为0.349%,与超声提取、回流提取相比,具有操作简单、得率高、提取时间短等特点。5.获得了一种澄清鲜姜黄提取液的絮凝剂复配方法。通过筛选,发现壳聚糖絮凝效果较好,最佳絮凝工艺为:壳聚糖加入量为0.4/L,加热时间为1h,加热温度为40℃。通过几种试剂的复配实验发现,以壳聚糖与聚合氯化铝复配效果最佳,其最佳添加量为:壳聚糖为0.35/L和聚合氯化铝的为0.05/L。6.获得了大孔树脂联合制备液相色谱对总姜黄素的纯化工艺。选用DM301树脂作为纯化树脂,吸附率和解吸率分别可达88.93%、69.36%,浸膏中姜黄素的纯度可由11.54%提高到29.20%。采用制备液相色谱对姜黄提取液进行纯化,实现了杂质与姜黄素类化合物的快速分离,纯化物中总姜黄素含量可达93.57%。
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