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目的利用RNA干扰技术,以人eIF4E基因为靶基因设计特异性的小干扰RNA(small interference RNA, siRNA),构建人eIF4E基因短发夹RNA (short hairpin RNA, shRNA)重组慢病毒质粒表达载体,并进行PCR和测序鉴定；利用重组成功的慢病毒表达载体转染包装细胞293T,初步观察慢病毒颗粒对宫颈癌Hela细胞的感染情况,为进一步研究该载体对目的基因eIF4E的沉默效果以及探索宫颈癌基因治疗的新方法奠定基础。方法设计并合成人eIF4E基因特异性干扰片段,连接到经双酶切线性化的PLVTHM载体质粒,转化大肠杆菌(escherichia coli,E.coli) TOP10感受态细胞,筛选阳性菌落,扩增后提取质粒,进行PCR和测序鉴定；将成功插入干扰片段的慢病毒质粒PLVTHM、包装质粒pMDLg-pRRE、pRSV-REV、包膜质粒PMD2G按照一定比例混合,与转染试剂LipoD293TM DNA In Vitro共同转染包装细胞293T,收集含有慢病毒颗粒的培养基上清液,浓缩病毒颗粒并测定滴度,将慢病毒颗粒感染Hela细胞,初步观察Hela细胞感染情况。结果经过PCR鉴定和测序分析,成功构建出4个人eIF4E基因shRNA重组慢病毒表达载体；慢病毒质粒转染293T细胞包装生产慢病毒颗粒,收集浓缩后病毒滴度达4×108TU/ml;感染Hela细胞后,初步观察发现强弱不等的荧光信号。结论成功构建了4个人eIF4e基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体,并包装出慢病毒颗粒,成功感染了宫颈癌Hela细胞,为进一步研究宫颈癌靶向基因治疗奠定基础。