胰岛素样生长因子1作用下的骨髓间充质干细胞对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制

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目的:通过观察胰岛素样生长因子1(IGF-1)作用过的骨髓间充质干细胞(BMSC)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响,探讨治疗肺纤维化的新方法。方法:体外分离、培养雄性6周龄SD大鼠的BMSC。将48只雄性成年SD大鼠(体重200-240g)随机分为4组,阴性对照组(N),博莱霉素组(B),间充质干细胞组(M),IGF处理组(I)。处理方法为:N组经支气管注入1ml生理盐水,B、M、I组均经支气管注入1ml博莱霉素(5mg/kg)。在造模2d后,B组大鼠经尾静脉注入生理盐水0.5ml,M组大鼠经尾静脉注入CM-Dil标记的骨髓间充质干细胞0.5ml(细胞数为2×106),I组注入相同数量的标记BMSC(经过IGF-1培育48h)。在造模的第7d、14d、28d批量处死各组大鼠,留取肺组织进行HE染色、Masson染色评价肺组织病理变化,冰冻切片观察肺组织内细胞定植情况、消化法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,RT-PCR方法检测各组大鼠肺组织肝细胞生长因子(HGF) mRNA的表达水平。结果:M、I组在显微镜下可见红色荧光标记的BMSC, I组不同时间点的IOD值均高于M组,且M、I组的荧光在28d时都有所衰减。M、I组的炎症在实验早期便轻于B组,其中M组更明显,至28天时M、I组炎症评分与N组无统计学差异。B、M、I组肺纤维化评分在博莱霉素注入14d时都明显高于N组(分别P<0.01,P<0.05,P<0.05),28d时M,I组的肺纤维化程度轻于B组(分别P<0.05,P<0.01),但M、I两组之间始终不存在统计学差异。B组的羟脯氨酸含量在整个实验阶段均高于其他三个组(P均<0.01),而I组的值始终与N组无差异(P均>0.05),M组的值在早期大于I、N组,至28d降至与对照组间没有统计学差异。N组、B组的HGFmRNA表达一直保持在较低水平,M、I组HGFmRNA的表达水平在第7d时没有差异,均高于N、B组(P均<0.01),至第14d时I组的值开始高于M组(P<0.05),28d时这种差异更加明显(P<0.01)结论:IGF-1可以促进BMSC异体定植从而对肺损进行更有效的修复,机制可能是其增加了BMSC分泌的HGF量。
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