顺铂调控STAT1/C-Myc通路抑制Hela细胞增殖

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目的:研究STAT1/c-Myc通路对人宫颈癌Hela细胞生长、增殖及对顺铂敏感性的影响及其作用机制。  方法:1.用RNA干扰的手段沉默STAT1,用Real-time PCR法和Western blot法从mRNA及蛋白水平检测STAT1的表达以验证敲减效率,用Western blot法检测c-Myc蛋白相应的表达变化,用MTT法和BrdU法检测细胞生长增殖的状态;  2.用Western blot法检测STAT1及c-Myc在不同浓度DDP处理下的表达;  3.进一步用DDP和靶向STAT1干扰RNA联合处理Hela细胞后分为4组,用Westernblot法检测c-Myc的表达差异,用MTT及Brdu法观察细胞生长增殖的差异。  结果:1.STAT1-siRNA使Hela细胞中STAT1的表达下调70%,同时c-Myc的表达上调近30%,促进了Hela细胞生长和增殖;STAT1能够抑制Hela细胞生长与增殖、抑制c-Myc的表达;  2.DDP浓度为5 mg/L时,STAT1蛋白表达上调1.5倍,DDP浓度为10 mg/L时,STAT1蛋白表达上调近2倍;STAT1上调、c-Myc下调的程度与DDP的处理浓度成正相关,与Hela细胞生长增殖状态呈负相关;  3.DDP通过上调STAT1表达、抑制c-Myc表达,达到抑制Hela细胞生长与增殖的作用;STAT1-siRNA可以削弱DDP对Hela细胞生长和增殖的抑制效应及对c-Myc的抑制作用。  结论:1.Hela细胞中c-Myc是STAT1发挥抑癌作用的靶点基因之一;  2.STAT1/c-Myc通路介导了DDP抑制Hela细胞生长、增殖的作用;  3.STAT1可增强Hela细胞对DDP的敏感性。
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